SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法的操作介紹
(1)制膠 用30%丙烯酰胺溶液－分離膠緩沖液－20%十二烷基硫酸鈉溶液－10%過硫酸銨溶液（新鮮配制）-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分離膠液，灌入模具內至一定高度（剩余體積留作制備濃縮膠用），用水封頂，聚合完畢，傾去水層。再用30%丙烯酰胺溶液-濃縮膠緩沖液-20%十二烷基硫酸鈉溶液-10%過硫酸銨溶液-四甲基乙二胺-水(0.8∶1.3∶0.025∶0.05∶0.005∶2.4)制成濃縮膠液，灌在分離膠上，插入樣品梳（如為圓盤電泳，用水封頂），待濃縮膠液聚合后，小心除去樣品梳或水。 (2)對照品和供試品溶液的制備 照各藥品項下的規定。 (3)電泳 垂直板電泳：恒壓電泳，初始電壓為80V，進入分離膠時調至150～200V，當溴酚藍遷移膠底處，停止電泳。 (4)用卡尺或用掃描定位法測量溴酚藍指示劑和蛋白遷移距離（如為圓盤電泳還應測量染色前后膠條長度，垂直板電泳膠片厚度低于1m......閱讀全文
蛋白質SDS]聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理
兩種方法原理不同，有差異是正常的。如果差距較大，要仔細分析。一般凝膠層析是非變性的，sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳是變性的，二硫鍵也被還原，所以是亞基（肽鏈）分子量。凝膠層析與分子形狀有關，一般marker都是球狀蛋白，所以測球狀蛋白分子量較準。sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳與分子形狀無關。有些蛋白性質特殊
《中國藥典》三部電泳法通則草案的公示（第二次）
國家藥典委員會擬修訂電泳法（SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法、等電聚焦電泳法），為確保標準的科學性、合理性和適用性，現第二次公示征求社會各界意見（詳見附件）。公示期為三個月。請相關單位認真研核，若有異議，請及時來函提交反饋意見，并附相關說明、實驗數據和聯系方式。來函需加蓋公章，收文單位為“國家藥典委
SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質分子量
一、原理用聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離鑒定蛋白質（protein），主要依賴于電荷效應和分子篩效應。再與標準樣品對照即可確定各區帶的成分。要利用凝膠電泳測定某樣品的蛋白質分子量就必須去掉其電荷效應，使樣品的蛋白質分子的遷移率完全取決于分子量。如在電泳體系中加入一定濃度的十二烷基硫酸鈉（Sodiumdod
蒸餾法的實驗操作步驟介紹
加料 將待蒸餾液通過玻璃漏斗小心倒入蒸餾瓶中，要注意不使液體從支管流出。加入幾粒助沸物，安好溫度計。再一次檢查儀器的各部分連接是否緊密和妥善。 加熱 用水冷凝管時，先由冷凝管下口緩緩通入冷水，自上口流出引至水槽中，然后開始加熱。加熱時可以看見蒸餾瓶中的液體逐漸沸騰，蒸氣逐漸上升。溫度計的讀
變性條件下的凝膠電泳實驗——SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗
實驗方法原理SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法主要依據蛋白質的分子量對其進行分離。SDS 與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其穩定地存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS 蛋白質復合物的長度與其分子量成正比
常用的一些測定蛋白質分子量的幾種方法介紹
1．凝膠過濾法 凝膠過濾法分離蛋白質的原理是根據蛋白質分子量的大小。由于不同排阻范圍的葡聚糖凝膠有一特定的蛋白質分子量范圍，在此范圍內，分子量的對數和洗脫體積之間成線性關系。因此，用幾種已知分子量的蛋白質為標準，進行凝膠層析，以每種蛋白質的洗脫體積對它們的分子量的對數作圖，繪制出標準洗脫曲線。未知
聚丙烯酰胺凝膠電泳法的操作過程和所需儀器
1.儀器裝置通常由穩流電泳儀和圓盤或平板電泳槽組成。其電泳室有上、下兩槽,每個槽中都有固定的鉑電極,鉑電極經隔離電線接于電泳儀穩流擋上。2.試劑(1)溶液 A取三羥甲基氨基甲烷 36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L鹽酸溶液48ml,再加水溶解并稀釋** 100ml,置棕色瓶內,在
聚丙烯酰胺凝膠電泳的實驗操作方法介紹
1）凝膠管的制備將電泳玻管用小橡皮塞塞住底部，然后灌入新配的凝膠溶液（方法見下文）。每管加至液體高度為7．5厘米。為了保證凝膠表面平整可用注射器通過細針頭小心地加一層（高約1厘米）蒸餾水于表面上，勿使與凝膠液混合，室溫放置。如果條件合適溶液于 30—60分鐘內聚合而成凝膠。凝膠溶液的配制方法如下
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量（垂直...2
三、器材與試劑： 1．器材： ①夾心式垂直板電泳槽，凝膠模（135×100×1.5mm）（北京六一儀器廠） ②直流穩壓電源（電壓300—600V，電流50—100mA） ③吸量管（1,5,10 ml） ④燒杯（25,50,100 ml） ⑤ 細長頭的滴管 ⑥1ml注射器及6號長針頭 ⑦微量注射器（1
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量（垂直...3
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量（垂直板型電泳）-3⑤1%TEMED：取TEMED1ml，加重蒸水至100ml，置棕色瓶內4℃貯存。⑥10%過硫酸銨（AP）：稱AP1g，加重蒸水至 100ml，此液應每周新配，置棕色瓶內，4℃貯存。⑦電極緩沖液（0.1%SDS，0.1mol·L-1 p
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量（垂直...1
目的：1．學習SDS—PAGE測定蛋白質分子量的基本原理。2．掌握垂直板型電泳的基本操作技術。二、原理：蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時，它的遷移率取決于它所帶凈電荷以及分子的大小和形狀等因素。1967年，Shapiro等人發現，如果在聚丙烯酰胺凝膠系統中加入陰離子去污劑十二烷基磺酸鈉（sodium
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量（垂直...4
2、將長、短玻璃板分別插到 形硅橡框的凹形槽中。注意勿用手接觸灌膠面的玻璃。3、將已插好玻璃板的凝膠模平放在上貯槽上，短玻璃板應面對上貯槽。4、將下貯槽的銷孔對準已裝好螺絲銷釘的上貯槽，雙手以對角線的方式旋緊螺絲帽。5、豎直電泳槽，在長玻璃板下端與硅膠模框交界的縫隙內加入已融化的1%瓊脂（糖）。其目
免疫印跡法檢測原理
免疫印跡法是在蛋白質電泳分離和抗原抗體檢測的基礎上發展起來的一項檢測蛋白質的技術，它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應的高特異性相結合。第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）。抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶負電荷，在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動，分子量越小，泳
免疫印跡法的檢測原理
免疫印跡法是在蛋白質電泳分離和抗原抗體檢測的基礎上發展起來的一項檢測蛋白質的技術，它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應的高特異性相結合。第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶負電荷，在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動，分子量越小，泳
電泳分析法聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）操作步驟
樣品制備 樣品可以是任何包含蛋白質或核酸的材料。 如果需要，可以將分析樣品與化學變性劑混合，通常將SDS用于蛋白質，將尿素用于核酸。 SDS是一種陰離子去污劑，可使二級和非二硫鍵連接的三級結構變性，并根據其質量成比例地對每種蛋白質施加負電荷。尿素打斷核酸堿基對之間的氫鍵，使組成鏈退火。將樣
凱氏定氮法的操作介紹
1、樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支于有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部
平板劃線法的實驗操作步驟介紹
1．融化培養基：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基放入水浴中加熱至融化。 2．倒平板：待培養基冷卻至50℃左右，按無菌操作法倒2只平板(每皿約15m1)，平置，待凝固。 倒平板的方法：右手持盛培養基的試管或三角瓶置火焰旁邊，用左手將試管塞或瓶塞輕輕地撥出，試管或瓶口保持對著火焰；然后用右手手掌邊緣或小指
變性條件下的凝膠電泳實驗——SDS尿素膠凝膠電泳
實驗方法原理當蛋白質的電荷性質與其質量明顯相關時。小分子蛋白質在 SDS－PAGE 中的遷移率便不再與它們的分子量成比例。在這種情況下通常使用 SDS－尿素膠另外，SDS－尿素聚丙烯酰胺凝膠電泳對于免疫沉淀和在低離子強度下不溶的膜蛋白是非常有用的。實驗材料蛋白質溶液實驗步驟1. 工作溶液1.1 溶液
SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳法的操作過程和所需儀器
SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白分子量,是根據大多數蛋白都能與陽離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)按重量比結合成復合物,使蛋白分子所帶的負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷,消除了不同蛋白分子的電荷效應,使蛋白分子相對遷移率(R'')的大小完全取決于分子量的高低,因此可從已知分子
SDS聚丙烯酰胺與聚丙烯酰胺凝膠電泳原理上有何不同
最大的不同是聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）用的蛋白質不做任何變性處理。SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸鈉，是蛋白質變性劑，SDS能拆散蛋白質的折疊結構，然后沿伸展的多肽鏈的表面吸附。使肽鏈帶凈負電荷，蛋白質在電場中的泳動速度僅與蛋白質顆粒大小有關。聚丙烯酰氨（PAGE）凝膠電泳用于蛋白質與寡
SDSPAGE測定蛋白質分子量及蛋白質的純度鑒定
一、實驗目的與原理蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時，它的遷移取決于它所帶電荷以及分子大小和形狀等因素。1967年Shapiro等人發現，如果在聚丙烯酰胺系統中加入陰離子去污劑十二烷基磺酸鈉（SDS），大多數蛋白質能與SDS按一定比例結合，即每克蛋白質結合1.4g的SDS－復合物都帶上相同密度的負電荷，
浸取分離法的操作步驟介紹
浸取法分離可溶組分的步驟一般為： ①溶劑與固體物料密切接觸，使可溶組分轉入液相，成為浸出液。 ②浸出液與不溶固體（殘渣）的分離。 ③用溶劑洗滌殘渣，回收附著在殘渣上的可溶組分。 ④浸出液的提純與濃縮，取得可溶組分的產品。 ⑤從殘渣中回收有價值的溶劑。 leaching；solid-l
關于紙電泳法的操作方法介紹
(1) 電泳緩沖液 枸櫞酸鹽緩沖液(pH3.0)。取枸櫞酸 (C6H8O7·H2O)39.04g與枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H2O4.12g，加水4000ml，使溶解。 (2) 濾紙 取色譜濾紙置1mol/L甲酸溶液中浸泡過夜，次日取出，用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干，
關于卡爾·費休法的操作相關介紹
費休法屬 碘量法，其基本原理是利用碘氧化二氧化硫時，需要—定量的水參加反應： I2 + SO2 + 2H2O → 2HI + H2SO4 上述反應是可逆的。當硫酸濃度達到0.05%以上時，即能發生逆反應。如果我們讓方程按照一個 正方向進行，需要加入適當的 堿性物質以 中和反應過程中生成的酸。
免疫印跡法的基本操作和介紹
SDS-PAGE和免疫印跡 一：蛋白質的提取 1、取出細胞，倒去培養液，用PBS洗滌細胞一次，充分除去PBS液體，把細胞置于冰上。配置細胞裂解液，細胞裂解液用滅菌水配置，然后按照1：100比例加入PMSF混勻，然后按照細胞的多少加入裂解液于培養瓶中，在冰上放置20min。在此期間每隔3-5m
紙層析法實驗研究的操作步驟介紹
1．稱取新鮮葉子2g，放入研缽中加丙酮5ml，少許碳酸鈣(防止葉綠素被破壞）和石英砂（幫助研磨），研磨成勻漿，再加丙酮5ml，然后以漏斗過濾之，即為色素提取液。 2．取準備好的濾紙條（2×20cm），將其一端剪去兩側，中間留一長約1.5cm，寬約0.5cm的窄條，并在濾紙剪口上方折疊出一條直線
二維聚丙烯酰胺凝膠電泳原理介紹
二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術結合了等電聚焦技術（根據蛋白質等電點進行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（根據蛋白質的大小進行分離）.這兩項技術結合形成的二維電泳是分離分析 蛋白質最有效的一種電泳手段.通常第一維電泳是等電聚焦,在細管中（φ1～3 mm）中加入含有兩性電解質、8M的脲以及非離子
二維聚丙烯酰胺凝膠電泳(twodimensional－polyacrylamide－gel－el
二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術結合了等電聚焦技術（根據蛋白質等電點進行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（根據蛋白質的大小進行分離）。這兩項技術結合形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。通常第一維電泳是等電聚焦，在細管中（φ1～3 mm）中加入含有兩性電解質、8M的脲以及非離子型去污
電泳分析常用方法SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳法操作方法
SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白分子量,是根據大多數蛋白都能與陽離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)按重量比結合成復合物,使蛋白分子所帶的負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷，消除了不同蛋白分子的電荷效應,使蛋白分子相對遷移率(R'')的大小完全取決于分子量的高低，因此可從已知
聚丙烯酰胺凝膠電泳原理特性和SDS聚丙烯酰胺凝膠電...2
二、聚丙烯酰胺凝膠電泳原理聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacryamide gel electrophoresis，簡稱PAGE）根據其有無濃縮效應，分為連續系統與不連續系統2大類，前者電泳體系中緩沖液pH值及凝膠濃度相同，帶電顆粒在電場作用下，主要靠電荷及分子篩效應；后者電泳體系中由于緩沖液離子