實驗室微生物菌種純化方法
1、傾注平板法首先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養瓊脂培養基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養。單一細胞經過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復上述步驟數次,便可得到純培養物 2、涂布平板法首先把微生物懸液通過適當的稀釋,取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上,然后用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養基表面上,經恒溫培養便可以得到單個菌落。3、平板劃線法最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多,常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。當接種環在培養基表面上往后移動時,接種環上的菌液逐漸稀釋,最后在所劃的線上分散著單個細胞,經培養,每一個細胞長成一個菌落。4、富集培養法富集培養法的方法和原理非常簡單。我們可以創造......閱讀全文
菌種保藏方法大全
? 一、基本原理 微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 二、保藏
菌種保存的原理
菌種保存的原理是預防或減緩DNA 復制時自發突變導致菌種退化,因此要創造代謝不活潑的狀態,而菌種保存時使菌種進入休眠態(孢子、芽孢),并創造干燥、低溫、缺氧、缺營養的環境,創造的環境越接近此狀態,所保存的菌種的時間就越長,所以從原理上講,所有菌種都可用這種方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感嗜
菌種保存方法匯總
甘油冷凍保藏法 本方法適合于中、長期菌種保藏,保藏時間一般為2-4年左右. (1)用火焰滅菌的接種環取斜面菌種在平皿上劃線分離單菌落. (2)平皿倒置于30℃或37℃恒溫培養箱,培養24-48小時,至單菌落的大小為3mm左右. (3)挑取一個單菌落,接種于一個裝50mL
菌種保藏的方法
菌種是主要的生物資源,也是食用菌生產首要的生產資料。一個優良的菌種被選育出來以后,必須保持其優良性狀不變或盡可能地少變慢變,才不至于降低生產性能,能長期在生產中使用。因此,菌種保藏在食用菌生產上具有重要的意義。 各種微生物由于遺傳特性不同,因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏
微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術
微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術-、安瓶管開封?1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。?2.用火焰將安瓿管頂端加熱。?3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。?4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養?1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管內,輕
微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術
微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術-、安瓶管開封1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。 2.用火焰將安瓿管頂端加熱。 3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。 4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養 1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管內,輕輕
銀耳菌種的分離實驗
一、實驗目的 1.了解混合類型菌絲的概念; 2.掌握銀耳菌種分離的方法; 3.學會銀耳耳木分離的具體方法步驟。 二、實驗材料 長有銀耳的段木若干根、鋸條、解剖刀、接種鑷子、斜面培養基、75%的酒精棉球、培養皿、0.1%升汞水、手表、紗布、酒精燈、接種箱等。 三、實驗步驟 1.選一根生
菌種保藏方法大全共享
基本原理? 具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以下幾種
4℃下菌種保藏方法
1、液體石蠟保存法先將液體石蠟滅菌,然后放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發掉備用。再將需要保存的菌種在最適宜的斜面培養基中培養,用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長好的斜面培養基上,用量以高出斜面頂端1cm為準。試管需直立,置4℃或室溫下保存,一般無芽胞細菌可保存1年左右。2、高層半固體瓊脂石蠟保存
菌種保藏方法大全(二)
?? 四、操作步驟、各保藏法的應用范圍及優缺點 下列各法可根據實驗室具體條件與需要選做。 1.斜面低溫保藏法 將菌種接種在適宜的固體斜面培養基上,待菌充分生長后,棉塞部分用油紙包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。 保藏時間依微生物的種類而有不同,霉菌、放線菌及有芽孢的細菌保存2—4個月,移
管理菌種的相關流程
⒈菌株的采集實驗室用菌種:一是到國家法定機構采購,二是購買商業派生菌種,三是科研中菌種交流。不管是哪種來源,均統一采集。采集中嚴格按照規范執行。要求包裝可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保證菌種合格和環境安全。采集中要有菌種傳代標識。選擇有資質的標準菌株的合格供應商,每批標準菌株必須附帶有供應商的合格證
菌種種類有那些
一、固體菌種 母種→原種→栽培種 1、母種 母種:在試管或平皿瓊脂培養基上生長的純菌種稱為母種,因為是用試管制作 的,也稱之為試管種,因為是最早一級的菌種,也稱之為一級種。 試管的規格一般為22mm×220mm、20mm×200mm、18mm×180mm三種,如果采用液體菌種建議使用18mm×180
菌種的質量鑒定實驗
一、實驗目的??? 1.了解菌種質量鑒定的目的、原理,幾種常見食用菌菌種的質量標準;??? 2.掌握菌種質量鑒定的方法;??? 3.學會各級菌種外觀質量鑒定的方法。??? 二、實驗材料、工具??? 香菇、黑木耳、平菇、草菇的一級菌種、二級菌種各若干管(瓶),實驗前去掉標簽,貼上號碼,以便實驗后查對
常用菌種保藏方法(二)
4.沙土保藏法 (1)取河沙加入10%稀鹽酸,加熱煮沸30分鐘,以去除其中的有機質。 (2)倒去酸水,用自來水沖洗至中性。 (3)烘干,用40目篩子過篩,以去掉粗顆粒,備用。 (4)另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土,加自來水浸泡洗滌數次,直至中性。 (5)烘干,碾碎,通過100目篩子
菌種保藏實驗_穿刺法
實驗方法原理該方法操作簡便,是短期保藏菌種的一種有效方法。實驗材料細菌酵母菌放線菌霉菌試劑、試劑盒半固體培養基儀器、耗材培養試管穿刺管石蠟膜接種環接種針試管塞實驗步驟1.用接種針下端挑取菌種(針必須挺直),自半固體培養基的中心垂直刺入半固體培養中,直至接近試管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺線將針退出
菌種保藏的方法(一)
? 菌種是主要的生物資源,也是食用菌生產首要的生產資料。一個優良的菌種被選育出來以后,必須保持其優良性狀不變或盡可能地少變慢變,才不至于降低生產性能,能長期在生產中使用。因此,菌種保藏在食用菌生產上具有重要的意義。 各種微生物由于遺傳特性不同,因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏
菌種保藏方法大全(一)
???? 一、基本原理 微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 二、保藏方法
銀耳菌種的分離實驗
一、實驗目的1.了解混合類型菌絲的概念;2.掌握銀耳菌種分離的方法;3.學會銀耳耳木分離的具體方法步驟。二、實驗材料長有銀耳的段木若干根、鋸條、解剖刀、接種鑷子、斜面培養基、75%的酒精棉球、培養皿、0.1%升汞水、手表、紗布、酒精燈、接種箱等。三、實驗步驟1.選一根生長銀耳的朵大肉厚且密的耳木一根
瓷珠菌種保存流程
1.從培養18h以上的平板上刮去新鮮純培養物于菌種保存管中,配成大約3-4麥氏比濁度的菌懸液。2.擰緊保存管,來回顛倒幾次使細菌乳化,不能旋搖。3.用無菌移液器將菌種保存管內的液體吸取干凈,妥善放置被吸出的液體。4.擰緊保存管,迅速將其置于-20℃或-70℃冰箱中。
4℃下菌種保藏方法
1、液體石蠟保存法 先將液體石蠟滅菌,然后放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發掉備用。再將需要保存的菌種在最適宜的斜面培養基中培養,用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長好的斜面培養基上,用量以高出斜面頂端1cm為準。試管需直立,置4℃或室溫下保存,一般無芽胞細菌可保存1年左右。 2、高
菌種保藏方法大全(三)
???? 4.沙土保藏法 (1)取河沙加入10%稀鹽酸,加熱煮沸30分鐘,以去除其中的有機質。 (2)倒去酸水,用自來水沖洗至中性。 (3)烘干,用40目篩子過篩,以去掉粗顆粒,備用。 (4)另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土,加自來水浸泡洗滌數次,直至中性。 (5)烘干,碾碎,通過1
菌種保藏的方法(二)
?(五)甘油懸液保藏法 此法是將菌種懸浮在甘油蒸餾水中,置于低溫下保藏,本法較簡便,但需置備低溫冰箱。保藏溫度若采用-20℃,保藏期約為0.5~1年,而采用-70℃,保藏期可達10年。 將擬保藏菌種對數期的培養液直接與經121℃蒸汽滅菌20min的甘油混合,并使甘油的終濃度在10%~15
乳酸桿菌代表菌種
在口腔內能分離的菌有15種,包括:干酪乳桿菌(L.caei):亞種有干酪亞種(L.casei subst)、副干酪亞種(L. paracasei subs)、嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)。亞種有:嗜酸亞種(L.acidophilus subsp)、卷曲亞種(L.crispatus),
常用菌種保藏方法(一)
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。一、保藏方法大致可分為以下幾種: 1.傳
常用菌種的保藏方法
菌種,多是指國家指定的幾個菌種保藏中心的成品菌種,在液氮狀態下,盛放在安瓿管中。企業生產按國家要求,必須要國家指定的菌保中心購買菌種,不得采用外來菌種。 一、常用菌種保藏方法 1、菌種保藏原理 根據微生物的菌種生理、生化特性,在人工創造的條件下盡量降低微生物細胞的代謝強度,使細胞基
瓷珠菌種保存法
?傳統的菌種保存方式簡介??? 斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可廣泛用于細菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。??? 液體石蠟保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放線菌及需氧菌,方法簡便,可防止斜面干燥和氧氣進入,但一些固氮菌、分枝桿菌、毛霉、厭氧菌等不適宜用此法。??? 甘油冷凍保存法:用
二級菌種和三級菌種培養基的制備實驗
一、實驗目的 1.了解二級菌種和三級菌種培養基配制的原理;2.掌握制作二級菌種和三級菌種培養基的關鍵技術;3.學會固體培養基含水量的簡易測定方法。二、實驗材料木屑、種木、麥麩、石膏粉、糖、水、高壓鍋、750g菌種瓶或12cm×28cm×0.04cm的聚丙烯(低壓聚乙烯)折角袋、棉花、棉線、牛皮紙、
二級菌種和三級菌種培養基的制備實驗
一、實驗目的1.了解二級菌種和三級菌種培養基配制的原理;2.掌握制作二級菌種和三級菌種培養基的關鍵技術;3.學會固體培養基含水量的簡易測定方法。二、實驗材料木屑、種木、麥麩、石膏粉、糖、水、高壓鍋、750g菌種瓶或12cm×28cm×0.04cm的聚丙烯(低壓聚乙烯)折角袋、棉花、棉線、牛皮紙、水
病毒純化和蛋白純化區別
病毒純化和蛋白質純化都是生物制劑工程中常見的分離純化方法,但它們的對象不同,具體區別如下:1. 病毒純化與蛋白質純化對象不同。病毒純化的目標是將病毒從其它生物物質中進行分離和去除,以獲得單個且純凈的病毒顆粒,如用于疫苗生產的病毒載體,而蛋白質純化的目標是從生物體或來源中提取和純化單一或多種蛋白質,如
細胞的純化方法介紹(自然純化和人工純化)(二)
(1)上皮細胞與成纖維細胞的分離純化: 兩者在胰蛋白酶的作用下,由于成纖維細胞先脫壁,二上皮細胞要消化相當長的時間才脫壁,特別是在原代細胞初次傳代和早期傳代中兩種差別尤為明顯,故可采用多次差別消化方法將上皮細胞和成纖維細胞分開,方法步驟如下。 采用常規消化傳代方式將0.25%胰蛋白酶注入培養