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  • 酶的制備與純化技術研究

    酶的生產酶的生產是各種生物技術優化與組合的過程,分為生物提取法、生物合成法和化學合成法三種[2],其中生物提取法是最早采用而沿用至今的方法, 它是指采用各種提取、分離、純化技術從動物、植物、器官、細胞或微生物細胞中將酶提取出來;生物合成法是20世紀60年代以來酶生產的主要方法, 是指利用微生物細胞、植物細胞或動物細胞的生命活動而獲得人們所需酶的技術過程;而化學合成法因其成本高,且只能合成那些已經弄清楚化學結構的酶,所以難以進行工業化生產,至今仍處在實驗室研究的階段。酶的純化酶的純化屬于一種后處理工藝,包括粗制工藝與精制工藝,對超酶液進行濃縮精制是生產高質量酶制劑的重要環節。其提純手段一般是依據酶的分析大小、形狀、電荷性質、溶解度、專一結合位點等性質而建立。要得到純酶,一般需要將各種方法聯合使用。最常用的純化方法有根據溶解度特性的沉淀法;根據電荷極性的離子交換層析、等電點聚焦電泳等;根據大小或重量的離心分離、透析、超濾等;根據親和......閱讀全文

    酶的酶活和質量如何評判

    NSP(木聚糖,β-葡聚糖,纖維素)的檢測方法有三類:1,染色底物顯色法,適用于測定飼料中的酶活,主要是內切酶活,樓主介紹的,中國鮮為人知;2,DNS還原糖顯色法,適用于測定酶制劑產品中的酶活,外切酶活和內切酶活的混合結果,外切酶活站多數,中國常用;3.黏度法,適宜評估可溶性NSP酶的效果,中國不常

    關于凝結酶實驗的凝結酶介紹

      血漿凝結酶是能使含有肝素等抗凝劑的人或兔血漿發生凝固的酶類物質,致病株大多數能產生,是鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。傳統豆腐加工一般采用鹽類凝固劑和酸凝固劑,很少使用酶凝固劑。但鹽類凝固劑和酸凝固劑制得的產品存在一些問題,例如用鹽鹵制作的豆腐具有極佳的風味,但是豆腐持水性差,而且產品放置時間

    人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析

    人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中ATP酶(ATPase)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人ATP酶(ATPase)水平。用純化的人ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板,

    關于β淀粉酶酶的來源介紹

      β-淀粉酶主要存在于高等植物中,特別是谷物中,如大麥、小麥等,在甘薯、大豆中也有存在,在動物體內不存在。目前工業上使用的β-淀粉酶主要包括植物β-淀粉酶和微生物β-淀粉酶。  由于植物來源的β-淀粉酶生產成本較高,人們也開始重視微生物來源的β-淀粉酶,從20世紀60年代開始,已先后發現了來源于巨

    單胺氧化酶同工酶介紹

      單胺氧化酶同工酶是一種細胞外酶,以磷酸吡哆醛為輔酶。多分布在肝、腎等組織的線粒體中,其分布肝>心>腎>腦>肺>骨骼肌,血小板和胎盤中也含有MAO,其同工酶有三種,電泳時從陽極到陰極分別是MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ和MAO-Ⅲ,有兩個亞單位MAO-A和MAO-B。

    植酸酶的酶學性質介紹

    和其他酶類一樣,植酸酶活力受溫度、環境pH、激活劑、抑制劑、作用時間、底物及產物濃度等多種因素的影響。根據最適pH值的不同,Oh等(2004)將植酸酶(磷酸酯酶)分為兩個亞類:酸性植酸酶和堿性植酸酶。飼料工業中常用的是酸性植酸酶(也稱作組氨酸酸性植酸酶)。這種植酸酶催化活性較強,有最適的酸性pH值(

    生物酶學基礎固定化酶

    在合成工藝性化過程中,固定化酶在可操作性和經濟性兩方面都具備巨大的優勢。?除了使用方便,固定化酶擁有分離簡單和可重復使用兩大最主要的優點。反應完畢可以通過過濾等常規手段與產品分離,大大降低產品的下游處理成本,而且可以高效應用于各種類型的反應器,實現生產連續化和自動化,提升反應效率。另外,固定化酶的可

    鏈酶蛋白酶的配制方法

    自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染,經自消化的鏈酶蛋白酶的配制方法如下:把該酶的粉末溶解于10mmol./l Tris?HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中,配成20mg/ml濃度,于37℃溫育1h。經消化的鏈霉蛋白酶分裝成小份放在密封試管中,保存-20℃。

    胰蛋白酶及其系列酶制備

    酶是細胞產生的以蛋白質為主要成分的生物催化劑,與化學催化劑相比較,具有作用條件溫和、反應專一性強、反應副產物少等優點,因而廣泛應用于醫藥、化工、食品、日化、農業、飼料、環保等領域,應用種類及用量均逐年遞增。例如蛋白酶,應用于醫藥工業中,作為生化藥物促進食物蛋白質消化;應用在食品工業中,水解蛋白質成膚

    可以DNA結合的酶聚合酶

    聚合酶:聚合酶是從核苷三磷酸合成多核苷酸鏈的酶。它們通過向鏈上存在的先前核苷酸的3'-OH添加核苷酸起作用。因此,所有聚合酶都以5' - 3'方向起作用。DNA復制需要DNA依賴的DNA聚合酶,實現DNA序列的完美拷貝。有些DNA聚合酶具有校對功能,能夠檢測含氮堿基之間的錯配

    酶免疫技術抗體的酶標記方法

    用于酶免疫技術的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產物易于顯現;能商品化生產。目前酶免疫技術檢測中常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和堿性磷酸酶(AP),其次還有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和蘋果酸脫氫酶等。由于辣根過氧化

    植酸酶的酶學性質研究

    植酸酶是催化植酸及其鹽類水解成肌醇和磷酸的一類酶的總稱[1]。添加植酸酶能夠顯著提高植物性飼料中磷的利用率,減少飼料中無機磷的添加量以及動物糞便中無機磷的排出,降低植酸磷的抗營養作用,促進動物生長發育,減輕環境的磷污染,提高畜牧生產和生態效益[2]。隨著飼料工業的發展,植酸酶作為一種新型的飼料添加劑

    異淀粉酶的酶學特性

    微生物來源的異淀粉酶為誘導型胞外酶。酵母、細菌和某些放線菌均能產生異淀粉酶,但不同來源的異淀粉酶對于底物作用的專一性有所不同,對于各種不同聚合度的支鏈淀粉具有不同的分解能力。酶作用的最適溫度和最適pH環境及金屬離子對酶的影響都有差異。一般而言,酵母異淀粉酶最適pH為6~6.8,最適溫度為20~25℃

    生物酶學基礎凝固酶簡介

    凝固酶是實驗室鑒定葡萄球菌致病性的重要試驗。致病性葡萄球菌可產生兩種凝固酶,一種是與細胞壁結合的凝聚因子,稱結合凝固酶,它直接作用于血漿中纖維蛋白質,使發生沉淀,保衛與細菌外面而凝聚成塊;另一種凝固酶是分泌至菌體外,成為游離凝固酶,它能使凝血酶原變成凝血酶類產物,使纖維蛋白原變為纖維蛋白,從而使血漿

    固定化酶固定化酶與水溶性酶相比的優缺點

    優點:①固定化酶可重復使用,使酶的使用效率提高、使用成本降低。②固定化酶極易與反應體系分離,簡化了提純工藝,而且產品收率高、質量好。③在多數情況下,酶經固定化后穩定性得到提高。④固定化酶的催化反應過程更易控制。⑤固定化酶具有一定的機械強度,可以用攪拌或裝柱的方式作用于底物溶液,便于酶催化反應的連續化

    酶免疫技術中酶和酶作用底物是怎么樣的呢?

      酶和酶作用底物  (一)酶的要求:  一個酶蛋白分子每分鐘可催化10 3 ~10 4 個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合:  1.酶的活性要強,催化反應的轉化率高,純度高。  2.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量,方法簡單易行、敏感和重復性好。  3.作用專一性強 ,酶活性不受樣品

    雙酶切反應酶活性分析及雙酶切建議緩沖液

    同步雙酶切是一種省時省力的常用方法。選擇能讓兩種酶同時作用的最佳緩沖液是非常重要的一步。NEB每一種酶都隨酶提供相應的最佳 NEBuffer,以保證100%的酶活性。NEBuffer的組成及內切酶在不同緩沖液中的活性見《內切酶在不同緩沖液里的活性表》及每支酶的說明書。能在最大程度上保證兩種酶活性

    淀粉酶同工酶檢測的意義

    同工酶的測定有助于疾病的鑒別診斷。P-同工酶升高或降低時,說明可能有胰腺疾患;S-同工酶的變化可能是源于唾液腺或其他組織。當血清淀粉酶活性升高而又診斷不清時,應進一步測定同工酶以助鑒別診斷。瓊脂糖和醋纖膜電泳法是比較常用的測定同工酶方法。

    蛋白酶的按酶的來源分類

    按酶的來源可以分為動物蛋白酶、植物蛋白酶、微生物蛋白酶。

    關于工具酶的連接酶的介紹

      它是一種封閉DNA鏈上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的5'-PO4與另一DNA鏈的3'-OH生成磷酸二酯鍵。但這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的(T4DNA連接酶除外),而且必須是兩條緊鄰DNA鏈才能被DNA連接酶催化成磷酸二酯鍵。  連接酶有T4噬菌體

    植物蛋白酶關于酶的定義

      酶(enzyme)催化特定化學反應的蛋白質、RNA或其復合體。是生物催化劑,能通過降低反應的活化能加快反應速度,但不改變反應的平衡點。絕大多數酶的化學本質是蛋白質。具有催化效率高、專一性強、作用條件溫和等特點。酶參與人體所有的生命活動:比如思考,運動,睡眠,呼吸,憤怒,喜悅或者分泌荷爾蒙等都是以

    可以DNA結合的酶DNA連接酶

    DNA連接酶:是能夠使用來自ATP或NAD的化學能將先前切割或斷裂的DNA鏈聚集在一起的酶。連接酶在DNA滯后鏈復制中特別重要,因為它們將岡崎碎片組合成DNA鏈。連接酶在DNA修復和基因重組中也發揮重要作用。

    免疫酶技術中常用的酶底物系統

    各種免疫酶技術,最終都是以某種顯色反應而揭示待測物質來進行定性和定量分析。不同酶要選擇相應的底物,見下表。免疫酶技術中常用的酶-底物系統酶底物顯色反應測定波長/nm辣根過氧化物酶二氨基聯苯胺深褐色沉淀5-氨基水楊酸棕色449鄰苯二胺橘紅色492/460鄰聯甲苯胺藍色4254-硝基酚磷酸黃色400堿性

    人端粒酶(TE)酶聯免疫說明

    本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:???????????????????????????????????????????????????????? ?96T1 IU/L -40 IU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中端粒酶(TE)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中

    大鼠5α還原酶Ⅱ酶聯免疫分析

    大鼠5α-還原酶Ⅱ酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中5α-還原酶Ⅱ的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5α-還原酶Ⅱ水平。用純化的大鼠5α-還原酶Ⅱ抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單

    精氨酸酶的酶活性單位定義

    酶活性單位定義:在pH值9.5,37℃、1min內轉換1.0μmol?L-精氨酸成為L-鳥氨酸和尿素的酶量為一個活力單位。在有尿素循環(urea cycle)的人和哺乳動物體內才存在精氨酸酶,它的作用是體內尿素從精氨酸上水解下來,并生成L-鳥氨酸,這反應通常發生在肝臟細胞的胞液中。

    大鼠5α還原酶Ⅱ酶聯免疫分析

    大鼠5α-還原酶Ⅱ酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中5α-還原酶Ⅱ的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5α-還原酶Ⅱ水平。用純化的大鼠5α-還原酶Ⅱ抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單

    腺苷三磷酸酶(ATP酶)的簡介

      ATP是三磷酸腺苷的英文縮寫符號,它是各種活細胞內普遍存在的一種高能磷酸化合物。高能磷酸化合物是指水解時釋放的能量在20.92kJ/mol(千焦每摩爾)以上的磷酸化合物,ATP水解時釋放的能量高達30.54kJ/mol。ATP的分子式可以簡寫成A-P~P~P。簡式中的A代表腺苷,P代表磷酸基團,

    生物酶學基礎同工酶簡介

    概述  同工酶 (isozyme,isoenzyme)廣義是指生物體內催化相同反應而分子結構不同的酶。按照國際生化聯合會(IUB)所屬生化命名委員會(CBN)的建議,則只把其中因編碼基因不同而產生的多種分子結構的酶稱為同工酶。最典型的同工酶是乳酸脫氫酶(LDH)同工酶,用電泳方法將LDH同工酶分離,

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