實驗方法原理
實驗材料 保存于細菌中的克隆純的、已測序確證的人 EST 序列
試劑、試劑盒 LB 培養基超級肉湯培養基乙醇裂解液RNA 酶溶液緩沖液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1-甲基-2-吡咯烷酮硼酸鈉
儀器、耗材 離心機96 孔熱循環儀水浴鍋微量滴定板清洗儀
實驗步驟
實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其他」
1. 將密閉的克隆純的、已測序確證的人 EST 母板在 37℃ 培養過夜。
2. 取多套標準圓底 96 孔板,全部做好標記,每孔加入 100 ul 添加了 100 ug/ul 羧芐青霉素的 LB 培養基準備復制。
為保存母板,第一次復制母板時應該多重復幾套平板作為工作平板。應該核對這些 EST 克隆是裝在青霉素抗性的載體里,一般入 IMAGE 克隆都是這樣的。