研究人員還在CCI-IoN動物中進行了條件位置偏好實驗（CPP）。 光激活CeAGA-ChR2小鼠的CeAGA神經元產生對光激活腔室的位置偏好記憶，而對照組CeAGA-GFP小鼠不會，大概是由于該位置疼痛緩解。此外，CCI-IoN動物表現出自發性不對稱地擦拭受傷側，說明它們感受到自發性疼痛。 CeAGA-ChR2小鼠中CeAGA神經元的ChR2激活顯著減少了CCI-IoN小鼠的總擦拭時間，并且在刺激后期也具有持久作用。綜上所述，CeAGA神經元的激活可有效抑制慢性神經性疼痛模型中與疼痛有關的行為。
圖5，在慢性阻塞物損傷模型鼠中的CeAGA神經元激活強烈降低了傷害感受相關行為，并驅動了條件位置偏好。
研究人員對CeAGA投射出來的神經元進行了觀察，發現它投射到大腦中非常廣泛的區域。分析投射目標區域，研究人員注意到，許多CeAGA神經元的軸突靶標含有福爾馬林疼痛誘導的Fos +神經元。考慮到CeAGA神經元是GABA能的，原則上它們處于通過其投射有效抑制這些疼痛激活神經元活動的理想位置。實驗發現接受雙向光遺傳激活CeAGA區域的CeAGA-ChR2小鼠在所有投射目標區域均顯示出Fos+神經元數量的明顯減少。因此，CeAGA神經元可以有效抑制大腦中許多疼痛處理中心的神經激活。
圖6，從CeAGA神經元到全腦的投射
研究開始研究人員假設全麻的鎮痛作用與麻醉引起的意識喪失是分開的，尤其在低麻醉藥物濃度下。而在對由1.5％異氟烷捕獲的CANEISO-GCaMP6m神經元進行在體成像時，也確實發現在0.5％異氟烷下，更多的神經元被持續激活。為了準確考察劑量效應，研究人員轉而使用小劑量的氯胺酮，這在臨床上具有鎮痛作用。之前的研究表明，氯胺酮在12
mg/kg時對小鼠有鎮痛效果。在三個成像實驗（1.5％異氟烷，常規劑量的氯胺酮和低劑量的氯胺酮）中得到的結果表明，大多數被跟蹤觀察的神經元在所有三種情況下均被激活，包括低劑量氯胺酮。
為了測試低劑量氯胺酮的鎮痛作用是否需要CeAGA神經元的活性，研究人員對光遺傳抑制小鼠進行了辣椒素試驗。在辣椒素注入鼠爪后，鹽水組引起了強有力的爪舔。小劑量氯胺酮則可顯著減少舔舐時間。值得注意的是，當CeAGA神經元在辣椒素+氯胺酮條件下被光遺傳抑制時，小鼠舔爪的時間與辣椒素+氯胺酮條件下的時間相似，此時氯胺酮的鎮痛作用被阻礙了。該結果表明，CeAGA神經元的活性是小劑量氯胺酮緩解疼痛的作用所必需的。
圖7，對于所有CeAGA的目標區域，CeAGA神經元的激活降低了福爾馬林所誘導產生的活性，而抑制的CeAGA神經元則阻礙了低劑量氯胺酮的鎮痛作用。
CeA以前曾被認為是應激和安慰劑誘導的鎮痛的關鍵結構，CeA的損傷會損害其鎮痛作用。
目前還不知道全身麻醉藥如何誘導CeAGA神經元的瞬時或持續活化，也不知道持續激活CeAGA神經元是否會上癮。但這項工作提出了利用這種內源性止痛系統緩解慢性疼痛的令人興奮的可能性。可以給發展下一代不含鎮靜作用的止痛藥留一些啟示。