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  • 發布時間:2019-12-28 17:35 原文鏈接: 離子交換色譜儀離子交換劑(三)

    第二節 親水性離子交換劑

     

    親水性離子交換劑(多糖基離子交換劑)與水親和力較大,有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。

    一、纖維素離子交換劑:

    又稱離子交換纖維素,是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成。

    微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之降解后漂洗、研磨、脫水、烘干和粉碎制成的。微晶纖維素為白色或幾乎白色的細小粉末,無臭,無味,可壓成自身粘合的小片,可在水中迅速分散,不溶于水、稀酸溶液、稀堿溶液和大多數有機溶劑。

    1、類型:

    (1)按引入電荷基團的性質可分為陽離子交換纖維素(如羧甲基纖維素(CM)等)和陰離子交換纖維素(如二乙胺基乙基纖維素(DEAE)等)。

    (2)按電荷基團酸堿性強弱可分為強酸性、弱酸性、強堿性和弱堿性離子交換纖維素。

    近年來,用微晶纖維素經交聯制成了類似凝膠的珠狀弱堿性離子交換劑(DEAE-Sephacel),結構與DEAE相同,對蛋白質、核酸、激素及其它生物聚合物都有同等的分辨率。

    2、特點:

    (1)結構疏松,對生物高分子物質(如蛋白質和核酸分子)有較大的穿透性。

    (2)表面積大,有較大的吸附容量。

    (3)基質是親水性的,避免了疏水性反應對蛋白質分離的干擾。

    (4)電荷密度較低,與蛋白質分子結合不牢固,在溫和洗脫條件下即可分離,不會引起蛋白質變性。

    (5)纖維素分子中只有一小部分羥基被取代,結合在其分子上的解離基團數量不多,故交換容量小,僅為離子交換樹脂的1/10左右。

    (6)分辨率高。

    3、應用:

    適用于大分子多價電解質的分離。

    二、葡聚糖離子交換劑:

    葡聚糖離子交換劑是以交聯葡聚糖G-25和G-50為基質,通過化學方法引入電荷基團制成的。

    1、按引入電荷基團的性質分類:

    (1)陽離子交換葡聚糖。

    (2)陰離子交換葡聚糖。

    2、特點:

    葡聚糖離子交換劑的性質與葡聚糖凝膠相似,在強酸和強堿中不穩定,在pH =7時可耐熱120℃。它既有離子交換作用,又有分子篩性質,可根據分子大小對生物高分子物質進行分級分離。

    3、應用:

    (1)G-50型離子交換葡聚糖適用于相對分子質量為3×104~3×106物質的分離。

    (2)G-25型離子交換葡聚糖能交換相對分子質量較小(1×103~5×103)的蛋白質。

    三、瓊脂糖離子交換劑:

    瓊脂糖離子交換劑主要以交聯瓊脂糖CL-6B為基質,通過化學方法引入電荷基團制成的。

    1、按引入電荷基團的性質分類:

    (1)陽離子交換瓊脂糖:CM-Sepharose CL-6B等。

    (2)陰離子交換瓊脂糖:DEAE-Sepharose CL-6B等。

    2、特點:

    具有硬度大、性質穩定、網孔大、流速好和分離能力強等特點,尤其是介質對pH和溫度的變化均比較穩定,可在pH = 3~10和0~70℃范圍內使用,改變離子強度或pH時,床體積變化不大。

    3、應用:

    特別適合分離相對分子質量大的蛋白質和核酸等。


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