lowry法測定和酚酞試劑法有什么區別

　　bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。
　　bradford法，也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在 465nm，后者在595nm。在一定蛋白質濃度范圍內(0～100μg/ml)，蛋白質-色素結合物在595nm波長下的光吸收與蛋白質含量成正比。故可用于蛋白質的定量測定。蛋白質與考馬斯亮藍G-250結合在2min左右的時間內達到平衡，完成反應十分迅速，其結合物在室溫下1h內保持穩定。該反應非常靈敏，可測微克級蛋白質含量，所以是一種比較好的蛋白質定量法。
　　Lowry法是雙縮脲法和福林酚法的結合與發展，其原理是：蛋白質溶液用堿性銅溶液處理，形成銅-蛋白質的絡合鹽，再加入酚試劑后，除使肽鏈中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等顯色外，還使雙縮脲法中肽鍵、堿性銅的顯色效果更強烈。因此，Lowry法的顯色效果比單獨使用酚試劑強烈3～15倍，為雙縮脲法100 倍。由于肽鍵顯色效果增強，從而減小了因蛋白質種類引起的偏差。Lowry法的試劑由兩部分組成，試劑甲相當于雙縮脲試劑(堿性銅溶液)，可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應；試劑乙為磷鎢酸和磷鉬酸混合液，在堿性條件下極不穩定，易被酚類化合物還原生成鉬藍和鎢藍混合物而呈藍色反應，因此蛋白質的酪氨酸和胱氨酸等可顯色，顏色深淺與蛋白質含量成正比。