一、移液槍使用訣竅
移液槍是實驗操作上不可缺少的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現性好,那就要注意正確移液槍使用。
1. 影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差
(2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差
(3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,而且會污染槍頭
(4)試劑的揮發:吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善。
2. 具體使用方法
更換tip法:最精確。
(1)調節旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,動作的力度要保持一致,禁止廢動作。普通操作時,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段,tip尖端接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下,黃色tip 2-3 mm,藍色tip2-4 mm,避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進入槍頭。
(5)移出tip后,先在容器內壁輕輕靠住,使tip外壁液體流下。
(6)將tip貼在目標容器內壁,輕輕按到第一段,壓出液體。
(7)tip 尖端在容器內壁略上滑動,保留尖端少量液體,移出目標容器,手指卸掉 tip,注意不要使試劑濺出。
一只tip分注法:不適用于揮發性,有毒性試劑。
(1)同上述A-D,移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。
(2)同上述C,緩慢吸出液體。
(3)在目標容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段,可重復上述操作。達到目標容器原有液體不污染tip的目的。
轉移數ul的貴重試劑時的方法:
(1)同上述A-D,移出液面后,在容器內壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色tip進到液面1 mm以下,這最重要。
(2)tip尖端浸入目標容器的液面下,緩慢壓到第一段。
(3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復4-5次,,洗凈tip內壁液體。
(4)將tip 尖端移出液面,在內壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。
二、移液六部曲
1. 裝吸頭
移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉即可。
錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
2. 量程設定
操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10-100%量程范圍內操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35-100%量程范圍內操作。
量程調節:當由小量程調節至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉,旋轉到達超過所需量程1/3圈處再回調至所需量程。當由大量程調節至小量程時,直接連貫旋轉至所需量程。
3. 潤洗
用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。
注意:高溫或者低溫液體請不要潤洗!
4. 吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態,傾斜角度不能超過20°。
5. 吸頭浸入深度
6. 吸頭浸入時間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7. 吸液速度
勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內部,污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。
排液四種方式:
9. 手溫
移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
三、移液槍打油詩
移液槍是公家買
科學使用要記牢
馬馬虎虎用壞槍
實驗停滯心發毛
用槍之前看量程
這個原則很重要
擰過量程不允許
界限之內隨你調
酚仿抽提最壞槍
吸后槍頭要打掉
槍頭不扔且不說
倒置槍身更傻冒
槍身本是塑料造
氯仿腐蝕完蛋鳥
EB是強烈致癌物
吸取本應戴手套
奈何忘乎所以者
戴著手套把槍抱
EB因此四處污染
害人害己不知道
用完量程調最大
一把槍能用到老
遵守規范是公德
美麗環境大家造
By ZhuLu 2005.2
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