PNAS：科學家制備雙重核酸酶讓CRISPR技術更上一層樓

　　生物通報道：最近，美國西安大略大學的研究人員，就像玩分子樂高游戲一樣，向革命性的新基因編輯工具CRISPR/Cas9添加了一種工程酶。他們的研究發表在12月12日出版的美國國家科學院院刊PNAS，表明他們添加的這種工程酶，使得CRISPR基因編輯技術能夠更有效和有特異性地靶定基因。延伸閱讀：從Nature到Cell，多篇頂級論文指出CRISPR/Cas9系統不可或缺的元件；中外Science等兩篇論文 實現CRISPR多基因編輯與多重基因編輯；張鋒發表CRISPR新突破 實現簡單的多重基因編輯。

　　CRISPR為人類基因編輯提供的廣闊前景，令科學界沸騰，從而打開了用基因療法治療囊性纖維化和白血病等疾病的可能性。例如，在囊性纖維化中，有一個基因突變，就可導致非常大比例的患者患上疾病。如果可能的話，使用CRISPR將那個突變的基因從基因組中去除，這種疾病就可能被治愈。

　　該項研究的首席研究員、Schulich醫學及牙科學院的副教授David Edgell說：“CRISPR的問題在于，它會切割DNA，但另一方面DNA修復將修復這個切口并把它粘在一起。這意味著，它會再生CRISPR正試圖靶定的位點，從而產生了一個無效循環。我們添加這種酶的一個新奇之處在于，它阻止了這種再生的發生。”

　　西安大略大學的研究人員制備了一種新酶，稱為TevCas9，它切割兩個部位的DNA，而不是一個部位，使DNA修復更難再生切割部位。研究人員通過向核酸酶Cas9上添加了一個酶（稱為I-Tevl）制備了TevCas9，Cas9是CRISPR中用來切割DNA的典型酶。

　　該研究還表明，添加Tev除了能夠更特異性地靶向基因之外，而且還不太可能導致基因組的脫靶效應，這是任何潛在治療應用的一個重要問題。

　　本文共同作者、Schulich醫學及牙科Robarts研究所科學家副教授Caroline Schild-Poulter指出：“因為有兩個切割位點，這兩個位點在基因組中隨機發生的機會較少；比起僅僅切割一個位點的機會更少。這還有待于檢驗，但這充滿了希望和期待。”