紫外可見分光光度計的工作原理是由光源發出連續輻射光，經單色器按波長大小色散為單色光，單色光照射到吸收池，一部分被樣品溶液吸收，未被吸收的光經檢測器的光電管將光強度變化轉變為電信號變化，并經信號顯示系統調制放大后，顯示或打印出吸光度A（或透射比T），完成測定。
紫外可見分光光度計走進高端。采用時間分割雙光束，優化設計采用C-T式單色器光路系統；采用高靈敏度、高穩定性光電檢測器；獨立優化的模塊化SMPS和AMP電子線路系統，有效降低光噪聲、電噪聲。儀器雜散光、光度線性、噪聲和基線平直度等關鍵指標均已到達國際高端先進的水平。
首次使用紫外可見分光光度計人員須知：
1、首次使用紫外可見分光光度計的人員，一般來說，一定要詳細閱讀儀器安全操作手冊，否則嚴禁操作儀器。準備操作儀器前，需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下，表面指針是否指向零刻度。如若不是，理應先調零然后才能連接電源。在使用的過程中，操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰，放大器使用過后，一定需要把檔位歸置到零。
2、除此之外，在操作紫外可見分光光度計時，操作人員需要留意一下機器的干燥劑，因為這是非常重要的。通常情況下，干燥劑有效時，儀器的工作是不會出現任何問題的。可是當干燥劑失效之后，所出現的問題是非常嚴重的。除了儀器上面顯數不準之外，很容易使反射鏡變得污穢，從而使得光線率不準確。因此，日常使用儀器時，一定要注意干燥是否有效。當發現失效后，要及時進行更換。
紫外可見分光光度計屬于光學儀器的一種，可廣泛應用于醫療衛生、化學化工、環保、地質、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方面，用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。