這一步僅為基因表達的系列分析 cDNA 合成中實驗方案 A 的一部分,在實驗方案 B 中,cDNA 已經結合到鏈霉抗生物素包被的 PCR 試管上,因此不必用磁珠結合。
實驗材料 | 磁珠 |
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試劑、試劑盒 | Dynabead M-280鏈霉抗生物素 |
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儀器、耗材 | 磁設備 |
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實驗步驟 | 實驗方案 A振蕩 lmin 以使 Dynabead M-280 鏈霉抗生物素重新成為混懸液。 將 2X 的 100 ul Dynabeads 轉移至 U—個 1.5 ml 的 Eppendorf 試管中。 用磁設備固定磁珠,移去上清液。 用 200 ul 的 IX 結合及沖洗緩沖液重懸磁珠沖洗 3 次,固定磁珠,移去沖洗液。 將 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成兩份各 10ul,每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 結合及沖洗緩沖液;混合后加入一份沖洗過的磁珠。 混合后,在室溫下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。 用磁設備固定磁珠,棄去上清液。 用 200ul 的 IX 結合及沖洗緩沖液沖洗固定的磁珠 3 次,然后再用 200ul 的 LoTE 沖洗 1 次。 在沖洗完最后 1 次后,固定磁珠并移去 LoTE。 繼續進行第 5 步
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