離子交換層析（Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC）是以離子交換劑為固定相，依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。
| 實驗材料 | 蛋白質 |
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| 試劑、試劑盒 | 離子交換緩沖液 |
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| 儀器、耗材 | 離子交換層析柱梯度混合器電導表 |
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| 實驗步驟 | 1. 配制離子交換層析緩沖液，安裝好層析柱，但以離子交換層析緩沖液取代其中的凝膠過濾緩沖液。
圖一、用于蛋白質離子交換層析的梯度混合儀器
2. 用起始梯度的緩沖液溶解含蛋白質混合物的樣品。
3. 棄去柱床上部的大部分緩沖液，并將樣品加在凝膠的頂上。只要樣品的離子強度不超過起始緩沖液的離子強度，上樣體積不限。
4. 讓樣品流入凝膠柱床，并用緩沖液沖冼層析柱的內壁，用吸管往凝膠的頊上 加一層1 cm 高的緩沖液。 5. 連接梯度混合器，分部收集100個級分，每個組份相當于約1%總禪度體積。測各組分的A280以確定蛋白峰的所在，用電導表測離子強度以確定禪度的形狀。 展開 |
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