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  • 發布時間:2019-04-11 14:51 原文鏈接: 種子生活力溴麝香草酚蘭(BTB)法鑒定實驗

    實驗方法原理凡有生活力的種子能不斷地進行呼吸作用,吸收空氣中的O2,同時放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不穩定解離成H+和HCO3-。由于H2CO3不斷解離,就使周圍介質酸度逐步增加。用BTB測定出酸度的改變。BTB的分子結構式如圖:

     


    它的變色范圍為pH6.0-7.6之間,它在酸性介質中呈黃色,在堿性介質中呈藍色,中間經過綠色(變色點為pH7.1)。
    實驗材料

    玉米小麥種子

    試劑、試劑盒

    BTB溶液BTB瓊脂凝膠

    儀器、耗材

    恒溫箱培養皿鑷子濾紙藥物天平燒杯漏斗瓊脂BTB電爐量筒

    實驗步驟

    一、材料和設備

    玉米或小麥種子

    恒溫箱、培養皿、鑷子、濾紙、藥物天平、燒杯、漏斗、瓊脂、BTB、電爐、50  ml 量筒

    0.1%BTB溶液:稱取BTB 0.1克,溶解于煮沸過的自來水中,然后用濾紙濾去殘渣。濾液若呈黃色,可加數滴稀氨水,使之變為藍色或藍綠色,此液長期貯存于棕色瓶中。

    1.5%BTB瓊脂凝膠:取0.1%BTB溶液40 ml 置于燒杯中,另稱取0.5克瓊脂,將其剪碎后加入杯中,用小火(電爐)加熱并不斷攪拌。待瓊脂完全溶解,稍稍冷卻即可趁熱倒入9cm 培養皿中,使之成一均勻的薄層,完全冷卻后備用。

    二、實驗步驟

    1.浸種:將待測種子在30℃-35℃溫水中浸種5小時左右,以增強種胚的呼吸強度。

    2.顯色:取吸脹種子10粒,整齊地埋于備好的瓊脂凝膠中,注意要將胚埋入凝膠中。將培養皿置于35℃溫箱中一小時可見結果,兩小時以上結果更為明顯。觀察種胚周圍出現黃色暈圈的是活種子,否則是死種子。

    3.計算:逐一數出種胚周圍出現黃色暈圈的種子數,并計算出有生活力種子的百分率


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