血清總蛋白測定有很多，最主要的有凱氏定氮法、雙縮脲法、酚試劑法、比濁法、染料結合法和紫外分光光度法等，其中雙縮脲法應用最廣。它的原理主要是蛋白質分子中的肽鍵在堿性條件下與二價銅離子（Cu2+）作用生成藍紫色的化合物，這種顏色反應強度在一定濃度范圍內與蛋白質含量成正比，因此反應與兩分子尿素縮合后的產物雙縮脲與堿性銅溶液作用形成紫紅色的反應相似，故稱雙縮脲反應。此反應操作簡單，重復性好，干擾物質少，重復性好，在10-120g/L濃度范圍內都有良好的線性關系，但靈敏度較低，是目前臨床上首選的常規方法。其參考范圍為：成人60-80g/L。接下來我們主要分析一下血清總蛋白升高和降低主要說明了什么：
血清總蛋白增高：
（1）各種原因引起的機體明顯失水導致總蛋白濃度相對增高：如嚴重腹瀉、嘔吐、高熱等。但這時A/G變化不大，臨床又稱假性蛋白增多癥。
（2）血漿蛋白質合成增加：主要見于球蛋白合成增加，如多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥或單克隆性免疫球蛋白病等。
血清總蛋白降低：
（1）血液稀釋，導致總蛋白濃度相對降低：如靜脈注射過多低滲溶液或因各種原因引起的鈉、水潴留。
（2）攝人不足和消耗增加：食物中長期缺乏蛋白質或慢性胃腸道疾病所引起的消化吸收不良，因患消耗性疾病，如嚴重結核病，甲狀腺功能亢進，惡性腫瘤等，均可造成血清蛋白濃度降低。
（3）蛋白質丟失：嚴重燒傷時大量血漿滲出，大量失血，腎病綜合征時大量蛋白尿，潰瘍性結腸炎時腸道長期丟失一定量的蛋白質，這些病理改變均可使血清總蛋白濃度降低。