單克隆是指利用在細胞融合基礎上的B細胞雜交瘤技術。
雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體分泌功能，但不能在體外連續培養，小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下，只有B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交細胞才能具有持續培養的能力，形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。
一、B細胞雜交瘤技術
二、T細胞雜交瘤
三、陽性雜交瘤細胞的克隆化培養
雜交瘤細胞形成后的初期很不穩定，為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細胞對其生長影響，必須將陽性雜交瘤細胞進行單細胞分離培養，產生單克隆雜交瘤細胞，經2～3次檢測均為陽性的雜交瘤單個細胞，才能進行克隆化培養。
克隆化培養后的陽性雜交瘤細胞應及時凍存，最好保存在-196℃液氮中。
B細胞雜交瘤技術
1.細胞的選擇和融合：雜交瘤技術的目的是制備對抗原特異性的單克隆抗體，所以融合一方必須是經過抗原免疫的B細胞，通常選用被免疫動物的脾細胞，脾淋巴細胞的主要特征是抗體分泌功能。融合細胞另一方則要求在培養條件下的永生性，只有腫瘤細胞才是具備這一條件，所以選擇同一體系的骨髓瘤細胞，因多發性骨髓瘤是B細胞系惡性腫瘤，其特點是穩定易培養、自身不分泌免疫球蛋白及細胞因子、融合率高、是次黃嘌呤磷酸核酸核糖轉化酶（HGPRT）的缺陷株，是理想的脾細胞融合對象。
2.選擇培養基的應用：細胞融合的選擇培養基中有三種關鍵成分：次黃嘌呤（H）、氨甲蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），所以取三者的字頭稱為HAT培養基。次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷是細胞DNA合成的途徑；氨甲蝶呤（A）是葉酸的拮抗劑，可阻斷瘤細胞利用正常途徑合成DNA，而融合作用的瘤細胞是經毒性培養基選取出的缺乏HGPRT細胞株，不能在該培養基上生長，只有融合細胞具有親代雙方遺傳性能，才能在HAT培養基上長期存活與繁殖。
3.有限稀釋與抗原特異性的選擇：細胞融合是一個隨機的過程，需在融合細胞抗體篩選的基礎上進行特異性篩選。將融合細胞進行充分稀釋，進行克隆化處理，再將陽性細胞進行再次克隆化，應用特異性抗原包被的ELISA找出針對目標抗原的抗體陽性細胞株進行增殖，再進行冰凍，體外培養或動物腹腔接種。
T細胞雜交瘤
T細胞雜交瘤可分為小鼠細胞雜交瘤和人T細胞雜交瘤。
其基本過程是將激活的細胞與酶缺陷型淋巴瘤細胞融合，通過有限克隆稀釋，獲得特異性表達細胞受體（TCR）或其他功能的雜交瘤細胞。其主要步驟為：
1.淋巴瘤細胞系的選擇：要求有以下特征：
（1）體外能無限、快速生長。
（2）融合率高。
（3）不分泌淋巴因子和殺傷功能。
（4）缺乏某一特異性的細胞表面抗原或受體。
（5）HGPRT酶缺陷型。
2.特異性細胞的制備與活化：主要有可溶性抗原誘導激活的細胞、同種反應性細胞、人的特異性細胞等。
3.T細胞雜交瘤的篩選。