在微生物實驗室, 必須達到一定程度的無菌狀態, 避免微生物污染。 假如在一個不潔的實驗室或者早先打翻過樣品的地方做微生物實驗, 引入新的微生物污染樣品的幾率是很大的。
微生物的實驗可以分為兩大部分:前期準備和樣品檢驗。
事實上,保持整個實驗室清潔是非常重要的, 這樣就不用在滅菌前擔心太多了, 然而, 滅菌后必須保證樣品或者培養基免受污染。其實, 可以把滅菌想像成”一扇門”, 在培養基中或者一些設備比如吸管的微生物都在滅菌過程中被殺死了,沒有微生物困擾實驗了。必須保證滅菌后的環境(門后的部分)的潔凈, 杜絕滅菌后的培養基和設備受到污染。
一、無菌的重要性
要點 描述 原理 在壓力下產生的濕熱的蒸汽殺死微生物的營養體和孢子。 密封 滅菌鍋必須密閉以阻隔外部空氣, 避免空氣的存在會影響壓力并降低滅菌鍋里面的溫度。 滅菌壓力 在滅菌鍋內, 合適的滅菌溫度是通過壓力達到的, 壓力對于滅菌沒有效用但是使蒸汽溫度上升。 對于標準操作來說,15lbs/inch2時的121℃并趕走所有空氣可以達到滅菌的效果。 滅菌時間 當到達一定的溫度和壓力時, 需要保持一定的時間來達到效果,為了殺滅微生物,121℃必須保持至少15分鐘。 培養基滅菌 大部分情況下, 實驗室配置培養基后應滅菌,滅菌時應根據供應商指導, 使用合適的溫度時間; 有些培養基不適合滅菌的。 器皿滅菌 當滅菌器皿時,需要考慮使用數量,比如,一天用10根吸管,在滅菌時, 一般就可以以10根為一包, 這樣可以減低器皿在使用過程中遭受微生物的污染的可能性。 滅菌條 在滅菌過程中, 可以用滅菌條來監控效果, 滅菌條在滅菌前是有顏色的,滅菌后會變成黑色。 重新滅菌 假如一次滅菌無效, 可以重新進行滅菌過程, 但是,培養基是不可以進行第二次滅菌的, 應拋棄。 儲存 滅菌完成后, 培養基和器皿應妥善儲存。 一般來說, 培養基應存放于避光的潔凈空間,同時應參照供應商的指示。 要點 描述 簡述 物理分離方法, 使用高效過濾將微生物從液體培養基分離。 由于不需要加熱和冷卻過程,過濾比高溫濕熱滅菌省時間。 過濾頭 0.2微米的過濾頭可以分離所有的細菌營養體, 把它安裝在針筒末端。 要點 描述
1. 無菌技術 – 高壓濕熱滅菌
2.無菌技術 – 過濾 (Filtration)
3.無菌過程注意點
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