減數分裂實驗原理和步驟

 一、目的

    學習生殖細胞的取材和染色體制片，認識減數分裂各時期的形態特征。

二、原理 生物秀細胞實驗論壇交流

    減數分裂是形成生殖細胞的一種特殊方式的細胞分裂。它是遺傳學中一個特別重要的事件，是維持大多數動植物品種染色體數目世代穩定傳遞的根本機制。同時，基因的分離、自由組合以及交換無不是通過減數分裂發生的。可以說減數分裂是經典遺傳學的根本，動植物都是通過減數分裂形成配子，所以減數分裂通常以植物的花粉母細胞或動物的精巢、卵巢作材料進行觀察。減數分裂的特點是：連續進行兩次核分裂，而染色體僅復制一次，從而形成四個只含單倍數染色體的產物——生殖細胞（或配子）。

三、材料

1．  小麥雄花序。

2．  蝗蟲精巢。

四、器具和試劑

    鑷子、解剖刀、解剖針、載玻片、蓋玻片、酒精燈、吸水紙、滴瓶、皮頭鉛筆、火柴、顯徽鏡。

    卡諾氏固定液，改良苯酚品紅、70％酒精。

五、步驟 生物秀細胞實驗論壇交流

（一）小麥花粉母細胞涂片觀察

1．  取材和固定：當小麥植株開始挑旗，旗葉與下一葉片的葉耳間距約3～5cm，花藥長度約2.0～2.5mm，氣溫在23℃～25℃時，將穗子剝出，在卡諾氏固定液中固定24小時。如暫不制片可轉入70％酒精中，4℃保存。

2．  大鼠細胞染色和壓片：從穗中部小穗中取出花藥若干置于載片上，切去花藥端部，滴兩滴改良苯酚品紅，用攝子擠壓花藥，使內含物全部擠出，除去藥壁，將擠出的細胞輕輕敲打；如果花藥較小，也可滴兩滴染液后用鑷子直接將花藥搗碎，去除未碎的組織，然后蓋上蓋玻片，在酒精燈上微微加熱。用左手拇指及食指固定蓋片與載片，勿使其移動。右手拇指用力壓蓋玻片，使細胞伸展開。

3．  鏡檢：由于小麥小穗發育是以中部小穗最先發育，然后依次向上、下推移，所以在一個穗子上往往能找到減數分裂的若干時期。如果中部花藥尚未進入減數分裂時期則需要另選一個更大的穩于取花藥制片。

（二）蝗蟲精巢精母細胞制片觀察

1．  取材和固定：捕捉進入繁殖期的雄性蝗蟲，剪開胸腹部體壁，放入卡諾氏固定液中固定24小時，暫不制片時，可重復固定一次，轉入70％酒精中4℃保存。

2．  制片：取蟲體剪去翅膀，在翅的基部后方，相當于腹部前端的背側，仔細剪干體壁，從精巢中前部取幾段精細管放在載片上，用解剖針撕碎精細管，除去大塊管壁組織，涂勻。

3．  染色觀察：加改良苯酚品紅3～5滴，染色10分鐘（必要時可在酒精燈上快速掠幾下）加上蓋片和吸水紙，以指壓法壓片。

    光鏡下，可以看到減數分裂的各個時期，以及精子的形成過程。