實驗方法原理 | 將培養物放在顯微鏡的載物臺上,打開電源,選擇合適的鏡頭,聚焦于標本。如果必要的話,將聚光器和相差環調節在中心。 |
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儀器、耗材 | 倒置顯微鏡 擦鏡紙 |
實驗步驟 | 1. 確保顯微鏡(配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環)潔凈(用 70 % 乙醇擦拭載物臺。如果有必要,用擦鏡紙清潔物鏡)。 2. 打開電源,將燈光強度從最低開始調至合適的強度,而不是直接打到強光。 3. 檢查光源與聚光器的銜接: (a)將一張染色切片、培養瓶或培養皿放在載物臺上; (b)關閉視場光圈; (c)聚焦在可變光闌上; (d)將可變光闌成像調整到視野的中央。 4. 將相差環調至中央: (a)如果顯微鏡配有相差望遠鏡,將之插入標準目鏡位置,然后聚焦于相差環,檢査聚光器環(黑色背景中的白環)是否與物鏡環(白色背景中的黑環)同軸; (b)如果沒有相差望遠鏡,則將染色的標本換為沒有染色的培養物(活的或固定的培養物),重新聚焦,調整相差環,直到獲得最優對比。 5. 觀察細胞。10× 相差物鏡作為常規觀察已足夠,4× 相差物鏡不能提供足夠的細節資料,而高于 10× 的放大倍數則限制了觀察區域。 (a)注意生長期(例如,稀疏、亞匯合、匯合、致密); (b)注意細胞狀態(例如,清亮、透明或有顆粒、有空泡等)。 6. 檢査培養基的清亮程度(例如,無碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等),根據需要選擇一個放大倍數更高的物鏡。 7. 記錄觀察的結果。 8. 旋低變阻器(把燈光調暗),關掉電源。 9. 將培養液放回孵箱,或放在超凈臺上進行無菌操作。 |