實驗材料 | 葉組織 |
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試劑、試劑盒 | 研磨懸浮緩沖液 |
儀器、耗材 | 燒杯 Polytron 勻漿器 |
實驗步驟 | 1. 組織勻漿 (1) 收集 10 g 葉組織,放進一 400 ml 的燒杯中。 (2) 加入 200 ml 冰冷的研磨懸浮緩沖液。在 4℃ 的房間中,用 Polytron 勻漿器進行 6~7 個 3 秒鐘脈沖勻漿葉組織。 研磨重懸緩沖液: 10 mmol/L EDTA 50 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.0 0.33 mol/L 甘露醇 0.5 g/L BSA ( 無脂肪酸) 5 mmol/L 抗壞血酸鹽(用前添加) (3) 用網層米拉布(Calbiochem) 過濾勻漿,濾液倒進 4 個 50 ml 離心管中。 2. 勻漿在 8000 g(Sorvall HB-4 轉頭,7000 r/min)離心一分鐘。 3. 小心地傾去上清。加 1 ml 1x SH。用駝毛刷重新懸浮葉綠體,動作要輕。 4. 吸 2 ml 含 35% Pecoll 的 1x SH 到一個 15 ml 的離心管中作為緩沖層:其上覆蓋重懸浮的葉綠體。13000 g(Sorvall HB-4 轉頭,10000 r/min)離心 3 分鐘。 5. 棄去上清,沉淀用 15 ml 1x SH 洗兩次,再用適當體積的 1x SH 重新懸浮。 |
日前,西湖大學、西湖實驗室特聘研究員閆湞團隊在《細胞》上連續發表了兩篇關聯論文,報道了在葉綠體蛋白轉運的動力機制上取得的又一重大突破——揭示了葉綠體蛋白轉運的動力機制及其進化多樣性,為該領域的研究開辟......
葉綠體是植物進行光合作用的細胞器。正常發育過程受到核基因組和葉綠體基因組在多個層次的協同調控。核質互作的分子機理是葉綠體生物發生的核心科學問題之一。光合膜蛋白復合體的反應中心亞基通常由葉綠體基因編碼,......
RNA編輯廣泛存在于植物的線粒體和葉綠體中。RNA編輯作為一種RNA轉錄后加工機制,對于調控基因表達具有重要意義。RNAC-U的編輯是胞嘧啶(C)經過脫氨轉變為尿嘧啶(U)的過程。在此過程中,PPR(......
德國科隆大學的研究人員在NatureAging期刊發表了題為:InplantaexpressionofhumanpolyQ-expandedhuntingtinfragmentrevealsmecha......
葉綠體是植物和藻類細胞中可以通過光合作用將光能轉化為化學能的細胞器。作為一種由兩層膜包被的特殊細胞器,葉綠體含有其自身的基因組,其表達是與核基因組的表達緊密協調的。葉綠體的蛋白質有兩種來源,有一小部分......
葉綠體是植物和藻類細胞中可以通過光合作用將光能轉化為化學能的細胞器。作為一種由兩層膜包被的特殊細胞器,葉綠體含有自身的基因組,且其表達是與核基因組的表達緊密協調的。葉綠體的蛋白質有兩種來源,有一小部分......
葉綠體是植物和藻類細胞中可以通過光合作用將光能轉化為化學能的細胞器。作為一種由兩層膜包被的特殊細胞器,葉綠體含有其自身的基因組,其表達是與核基因組的表達緊密協調的。葉綠體的蛋白質有兩種來源,有一小部分......
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近年來,葉綠體基因組因基因組小、突變率和重組率低的特點,被廣泛用于植物系統發育、分子進化、譜系地理學的研究。榕屬(Ficus)作為桑科的最大屬,且是熱帶雨林的關鍵物種,而其系統發育關系仍需進一步研究。......