全自動生化分析儀使用的試劑、樣品量極微,這就對足量的要求很嚴格。因此定期檢測加樣系統,確保其加樣系統有著良好的重復性和準確性是很有必要的,本文介紹一種檢測方法。?
1.材料
1.1儀器:日立7170生化分析儀,光電分析天平(分度值為0.1mg)。?
1.2試劑:上海長征試劑,蒸餾水,患者血清。?
2.方法
2.1儀器加樣系統準確度和精密度的檢測?
用水減重稱量法檢測儀器加樣的準確度和精密度。用樣品杯盛足蒸餾水加蓋稱量得A(mg)后放入樣品盤或試劑室相應位置,進行吸樣操作,設吸樣量為xul,重新加蓋稱量得B(mg),因為加樣量很少,為減少稱量誤差,進行10次吸樣后再作第二次稱量取10次吸樣的均值作為一次加樣量計算測定結果。?
實際加樣量(mg)=(A-B)?
實際加樣量(ul)x?1=(實際加樣重量/蒸餾水比重)-樣品針(試劑針)的死體積ul加樣準確度=x1/x×100%?
標準差(s)=(∑(x1-xDD(-*6/7KG*2/3—DD)) 2/n-1KF)?
加樣精密度(cv)=s/xDD(-*6/7KG*2/3—DD)×100%?
2.2樣品針攜帶污染的檢查?
選擇AST高值和低值和混合血清各一份,先對高濃度標本進行測定三次分別為H1、H2、H3,計算均值HDD(-*4—DD),再立即測定低濃度樣本三次得結果L1、L2、L3。?
攜帶污染率=|L1-L3|/HDD(-*4—DD)×100%。
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2.3 STBZ試劑針攜帶污染的檢查?
取一份混合血清單獨測定血清磷10次,?(xDD(-*6/7KG*2/3—DD)±s)?得數 據X計算攜帶污染率。用此混合血清在測定血糖后再測定血清磷,如些操作10次,得數據Y。將兩組數據比較,配對t檢驗。求回歸方程Y=aX+b 。
3.討論
3.1 樣品針和試劑針的死體積問題?
根據儀器自身程序設置公式Y=AX+B,Y為死體積,X為設定的加樣量。樣品針:A=20%,B=4;試劑:A=8%,B=6。注意死體積設定不應隨意變小,否則會影響加樣的準確性。?
3.2儀器加樣系統的準確度和精密度的檢驗結果的判定?
如果xDD(-*6/7KG*2/3—DD)和X相差較大,說明儀器加樣的準確度不夠。若s、CV值很大說明儀器的精密度不好,都需要做相應的檢修。塑料注射器、注射器頭、密封圈、單向閥均為易損配件,應定期更換。
3.3從結果可見,若AST高值血清對低值血清無影響。樣品針攜帶污染很小,說明樣品針的沖洗是干凈的。從我們平時的實驗結果看樣品針攜帶污染是很小的。
3.4血糖試劑中含有一定量的磷酸鹽緩沖液,當試劑針測定血糖后立即測定血清磷容易引起測定值升高。本試驗借此檢測沖洗針是否沖洗干凈。兩組數據之間若無顯著差異(P>0?05),回歸方程中b值非常小。說明試劑針攜帶污染很小。我們在實際工作中發現試劑針受試劑交叉污染是很小的。?
即便如此,在日常工作中必須定期清潔樣品針,試劑針。由于自動生化分析儀在長期使用過程中,因試劑針受試劑的腐蝕和管道的老化使得注射加樣精密下降,從而導致儀器加樣系統的精密度下降。因此,定期對儀器加樣系統的質量控制是完全必要的。定期檢測儀器加樣系統的準確度和精密度,發現問題及時校正、檢修確保儀器在最佳狀態下運行。