一、實驗原理
SmIg是B細胞的抗原識別受體，也是B細胞特異的表面標志，用直接免疫熒光法可檢查出SmIg。用熒光素標記的抗Ig抗體，在一定條件下與淋巴細胞混合，熒光素標記的抗Ig抗體可以與B細胞表面的Ig結合，在熒光顯微鏡下觀察可見B細胞膜上出現熒光。此方法可用來鑒定B淋巴細胞。
二、實驗材料
1. ICR小鼠（北京大學醫學部實驗動物中心提供）
2. 異硫氰酸熒光素（FITC）標記的兔抗小鼠Ig抗體（購自BD公司）
3. Hank's液：pH7.4(內含0.1%NaN3)
4. 臺式離心機
5. 離心管、吸管、移液管等
三、實驗方法
1．采用頸椎脫臼法處死小鼠，解剖取出脾臟放入盛有6ml Hank's液的平皿中，用100目鋼網研磨，混勻。從中吸取1ml細胞懸液放入一試管中，加滿Hank's液，離心1000rpm，10分鐘，洗滌細胞一遍。傾去上清，沉積的細胞恢復1ml
容積，即為約1×10/ml的細胞懸液。另取一支試管，吸取1×107/ml的細胞懸液0.4ml加Hank's液3.6ml，即為1×106/ml的細胞懸液。
2．取2ml離心管兩只，各加入1×106/ml的細胞懸液1ml，用臺式離心機離心2000rpm，3分鐘，棄去上清液。一支加入熒光素標記的兔抗鼠Ig抗體100μl，另一支不加抗體作對照，置4℃冰箱30分鐘。
3．取出離心管，用Hank's液洗滌細胞兩次，以去除游離的抗體，最后一次離心后棄去上清液，留少許回流液，混勻，滴片，用熒光顯微鏡觀察。
四、實驗結果
熒光顯微鏡觀察，落射激發光下SmIg陽性細胞可見環狀或斑點狀熒光。用鎢絲燈光源透射光照明計數同一視野內淋巴細胞總數，共計數200～300個淋巴細胞，算出其中SmIg陽性細胞的百分數。
五、注意事項
在滴片前要徹底去除游離的抗體，以避免假陽性結果。