光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼察看到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以可以看到顏色，是由于光映照到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是由于植物吸收了光中的紅色光譜。酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
檢測單位：
光經過被檢測物，前后的能量差別即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。
檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。依據Bouger-amberT-beer規律，OD值與光強度成下述關系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
E＝OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長，在此波長下，此物質可以吸收最多的光能量。假如選擇其它的波長段，就會形成檢測結果的不精確。因而，在測定檢測物時，我們選擇特定的波出息行檢測，稱為丈量波長。
但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消弭這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消弭這個不精確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差能夠消弭非特異性吸收。
Anthos 酶標儀檢測值計算
儀器中的檢測器接納透過被檢測物的光能量，轉換成二進位數字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測物的透光值為100％。則實踐檢測中，檢測物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計算如下：
T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
其中T為透光值， Meas為檢測的二進位數值， Min為在 0％的狀況下檢測的二進位數值， Max為在100％的狀況下檢測的二進位數值，舉例如下：
MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
Anthos 酶標儀的中心定位
儀器會自動對酶標孔停止中心定位，中心定位是要消弭酶標孔底的凸凹惹起的厚薄不均帶來檢測的不精確。在對每一個酶標儀停止檢測時，儀器其實要停止35個點的丈量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準由于電壓不穩或燈泡磨損帶來的影響。
酶標儀的用處和其它提示
用于ELISA試劑的測定，普遍用于各種實驗室，包括臨床實驗室。
質量控制
質量控制是試劑檢測的重要要素。請依照試劑闡明書的請求停止質量控制。
空白校正
有一些試劑盒的說陰書將空白孔設置為空氣，其它大多數空白孔的設置是用試劑來設置的，請依照試劑盒的闡明書請求停止。
檢測結果的解釋
由于有相當多的要素會影響檢測的結果，如不同的酶標板，檢測試劑的體積，都會形成OD值的不，因而，只要運用同一酶標板反響的試劑檢測結果才干比擬和剖析。對結果的臨床解釋請按照試劑盒的闡明書停止。
酶標儀的運用留意事項
1、工作環境
酶標儀是一種精細的光學儀器，因而良好的工作環境不只能確保其精確性和穩定性，還可以延長其運用壽命。依據DIN VDE 0871條例，儀器應放置在無磁場和干擾電壓的位置。根據DIN 45 635 －19條例：
儀器應放置在低于40分貝的環境下。
為延緩光學部件的老化，應防止陽光直射。
操作時環境溫度應在15℃－40℃之間，環境濕度在15％－85％之間。
操作電壓應堅持穩定。
操作環境空氣清潔，防止水汽，煙塵。
堅持枯燥、潔凈、程度的工作臺面，以及足夠的操作空間。
2、操作留意事項
酶標儀的功用是用來讀取酶聯免疫試劑盒的反響結果，因而要得到精確結果，試劑盒的運用必需標準。許多醫院在運用酶標儀之前是經過目測判別結果，操作過程隨意性較大，在運用酶標儀后假如不能及時糾正操作習氣，會形成較大誤差。在酶標儀的操作中應留意以下事項：
運用加液器加液，加液頭不能混用。
洗板要洗潔凈。假如條件允許，運用洗板機洗板，防止穿插污染。
嚴厲依照試劑盒的闡明書操作，反響時間精確。
在丈量過程中，請勿碰酶標板，以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。
請勿將樣品或試劑灑到儀器外表或內部，操作完成后請洗手。
假如運用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害，請嚴厲依照試
劑盒的操作闡明，以防對操作人員形成損傷。
假如儀器接觸過污染性或傳染性物品，請停止清洗和消毒。
不要在丈量過程中關閉電源。
關于因試劑盒問題形成的丈量結果的偏向，應依據實踐狀況及時修正參數，以到達最佳效果。
運用后蓋好防塵罩。
呈現技術毛病時應及時與廠家聯絡，切勿擅自拆卸酶標儀。
酶標儀及洗板機選購指南
酶標儀（Microplate Reader）是對酶聯免疫檢測（ EIA）實驗結果停止讀取和剖析的專業儀器。酶聯免疫反響經過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物停止的，反響結果以顏色顯現，經過顯色的深淺即吸光度值的大小就能夠判別標本中待測抗體或抗原的濃度。
酶標儀普遍地應用在臨床檢驗、生物學研討、農業科學、食品和環境科學中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯免疫檢測試劑盒的應用，使得酶標儀在生殖保健范疇中應用越來越普遍，同時促進了生殖安康技術程度進步 。
目前國內許多計生站系統展開了酶免檢測項目，如：乙肝五項、愛滋病檢測、優生優 育系列檢測、激素檢測等。過去多數采用目測辦法，報出的結果缺乏科學的根據。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規則為：陰性對照品的 OD 值×2.5，經過目測無法判別標本孔的反響顏色能否超越臨界值。肉眼停止兩孔之間的顏色比擬可能還行，但比擬一孔的顏色能否超越另一孔顏色的2.5倍就不可能。
國內多家權威機構，如衛生部臨床檢驗中心和方案生育系統等屢次強調酶標儀的重要性，并請求酶聯免疫檢測試劑應運用酶標儀判讀，酶免試劑的質控也應運用酶標儀，并提供酶標儀測定的原始數據，而各廠家的試劑盒闡明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的 項目常常是一些本質性的感染和病變（如：肝炎、愛滋病、優生優育等），判讀更請求嚴謹，由誤診惹起的糾葛很難處置。另外，住院手術病人術前的丙肝、愛滋等 EIA 試劑檢測是防止因輸血惹起感染引發的醫療事故糾葛的必要手腕，正逐步被許多單位所采用。
我國免疫診斷辦法主要有如下三種：酶免（EIA）、放免（RIA）和發光，在市場上的狀況如下：
辦法
所處市場周期
放免
衰退期
酶免
生長期
發光
進入期
放免技術由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內市場逐步被淘汰，而化學發光試劑和設備比擬昂貴，使得其在國內的提高特別在計生系統提高需求較長時間，EIA 技術穩定，試劑價錢合理，供給充，酶免技術在中國市場處于生長期，因而購置酶標儀正適宜宜。
特別要提到的是，在中國的方案生育和婦幼保健系統裝備酶標儀曾經火燒眉毛。早在幾年以前, 世界衛生組織已倡議對孕婦停止 TORCH五項常規篩查，但是遺憾的是由于缺乏酶標儀和洗板機等設備，RCH的檢測在中國還未能普遍展開。TORCH 感染在圍產醫學中稱為TORCH綜合癥，由于孕婦, 胎兒和重生兒都易被感染, 它已遭到全世界婦產科和兒科的極大注重。妊娠期感染不只危害母體，常常還可對胎兒和重生兒產生嚴重影響。經過胎盤可惹起子宮內感染而招致流產、早產、死胎或胎兒生長緩慢和畸形，經過產道和母乳可惹起重生兒感染。如累及神經系統可形成不同水平的智力障礙以及各種癱瘓、失聰、失明等嚴重后遺癥，影響人口素質，因此 TORCH 感染與優生優育有極為重要的關系。因而，RCH（IgG和gM）檢查通常也稱為優生優育十項檢查。目前，TORCH的檢測辦法主要有放免（RIA）和酶免(EIA)。由于放免辦法需求特殊儀器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）辦法取代。EIA辦法具有特異性強，靈活度高，簡單快速，本錢低等優點，只需裝備有酶標儀和其他相應的設備 ，多數普通實驗室均可便當地展開 。 很顯然, 盡快在計生系統提高酶標儀等設備是一個迫切的需求。
這項工作的落實將有助于進步診治程度，降低母嬰發病率，從而進步整個國民的安康素質。目前市場上提供的EIA試劑越來越多，如：T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各種癌癥標志物、傷寒、副傷寒等，另外經過母嬰傳播的性傳播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎（如HBV、HCV)，以及胎兒的抗體，重生兒TSH的測定，疫苗反響等，市場上也都有成套 EIA 試劑盒供給。運用酶標儀有利于拓展檢測項目，進步檢測程度，其社會效益和 經濟效益并舉。
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