細菌內毒素檢測

實驗方法原理

鱟是一種海洋節肢動物，血液中含有一種變形細胞，此細胞的裂解物可與微量細菌內毒素起凝膠反應，即細胞裂解物中的一種酶被內毒素激活，使細胞裂解物中蛋白質形成凝膠。鱟試驗具有快速、簡便、靈敏等優點。

實驗材料 鱟試劑

試劑、試劑盒 生理鹽水無菌水內毒素

儀器、耗材 安瓶習慣水浴箱

實驗步驟

一、材料

1.   鱟試劑(即裝于安瓶內的鱟變形細胞裂解物的凍干制品)。

2.  待測物(血液、細菌培養上清液或注射劑等)。

3．標準內毒素(大腸桿菌內毒素含量100 ng/ml)、無熱原生理鹽水、無菌蒸餾水。

4．1 ml無菌吸管、37℃水浴箱等。

二、方法

1.   打開3支鱟試劑安瓶，各加0.1 ml無菌蒸餾水使之溶解，同時編號①、②、③。

2.  向①、②、③安瓶中分別加待測物、標準內毒素、無熱原生理鹽水各0.1 ml。

3.  輕輕搖勻后，垂直放37℃水浴，15～30 min后取出觀察有無凝固。

三、結果觀察

十十 形成牢固凝膠，倒持安瓶凝膠不動。

十 形成凝膠，但不牢固，倒持安瓶凝膠能動。

- 不形成凝膠。

凡結果陽性者表示內毒素陽性，本實驗②為陽性對照，③為陰性對照。