二倍體細胞培養法與一般培養相同，關鍵在于傳代，其傳代程序為： （1）吸除舊培養液注入另瓶中。 （2）用溫BSS沖洗1次。 （3）用0.25%溫胰蛋白酶消化，加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可；作用1~5分鐘。 （4）待細胞附著松動、細胞質邊緣卷起和間隔加大，便終止消化。為防止細胞丟失，可不必再用BSS沖洗，直接向瓶中加入培養液（新舊培養液按2：1 新舊混合）。 （5）輕輕反復吹打制成單個細胞懸液。 （6）按一分為二比例接種培養。
