現代液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇中,現如今多采用細粒徑以獲得高分辨率。但是,細粒徑填料的流體阻力往往很大,必須采用高壓泵以將流動相強制輸運通過柱子。所以,柱子必須能承受高壓而不泄漏、不破壞才行。色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。
常用的HPLC色譜柱多為硅膠基質填料的,又分正相色譜柱和反相色譜柱兩大類。其它填料的色譜柱還有聚合物填料的和無機填料的,應用較少。
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
2、反向色譜
反向色譜用的填料常是以硅膠為基質,表面鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反向色譜所使用的流動相極性較強,通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分zui先被沖洗出,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
色譜柱是液相色譜儀的最核心部件,價格相對昂貴,如避免強烈的碰撞和震動,不要讓柱床變干,避免在嚴寒環境受凍等。之前,我們先了解一下液相色譜柱的基本結構,色譜柱由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成......
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高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相......
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當今分析化學的領域,色譜分析占據了半壁江山,尤其是在藥物分析方面更是如此。例如《中國藥典》2005年版二部收載的藥物已有近43.1%的藥品質量標準不同程度的采用了高效液相色譜分析方法。尤其是復方制劑、......
1目的:色譜柱的使用和保養:液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實驗數據的必經之路。建立高效液......
分析型到制備型一套完整的填料體系,目前可提供的填料鍵合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和DMB。孔徑有60A、100A和300A三種,滿足不同條件的......
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