二 DNA甲基化
DNA甲基化:DNA甲基化是通過DNA甲基轉移酶在胞嘧啶環的第5個碳原子上共價加成甲基而產生的,從而產生5-甲基胞嘧啶(5-mC),在體細胞中,幾乎僅在二核苷酸CpG的對稱甲基化配對中發現了5-mC,而在胚胎干(ES)細胞中,在非CpG中也觀察到了大量的5-mC。5-mC作為表型和基因表達的主要表觀遺傳修飾的生物學重要性已得到廣泛認可。
此外在人和小鼠組織以及胚胎干細胞中已經檢測到一些新的修飾核苷酸:5-羥甲基胞嘧啶(5-hmC),5-甲酰基胞嘧啶(5-fC)和5-羧胞嘧啶(5-caC)。在哺乳動物中,這些修飾的核苷酸可能是由5-甲基胞嘧啶的迭代氧化產生的,該酶是由TET酶家族介導的。
DNA甲基化在正常生物發育和高等生物的細胞分化中起著重要作用,大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而調控基因性狀的表達。 基因表達以及幾乎所有類型的癌癥的發展也與DNA甲基化有關, 例如,由于各種環境影響,甲基缺乏可能導致5-甲基胞嘧啶含量的總體下降(DNA低甲基化),并且已被提議作為多種生物過程(例如癌癥)的分子標記。因此,DNA甲基化的研究目前也是熱門的研究之一。
三 DNA甲基化研究產品推薦
說到DNA甲基化的研究,我們有DNA甲基化定量檢測試劑盒和DNA甲基化修飾試劑盒,以及相關的抗體和應用于DNA甲基化研究的DNA樣本提取試劑盒。今天先給大家推薦推薦DNA提取試劑盒與DNA甲基化定量檢測產品。
【1】DNA樣本提取試劑盒
Epigentek可提供相關的DNA準備試劑盒,DNA樣品可以從細胞,組織和體液中制備,并且是大多數DNA甲基化應用和測定法中最常用的起始材料。高效,精確和高質量的DNA分離是成功進行基于DNA的實驗的關鍵前提。
FitAmp通用組織切片DNA分離試劑盒Cat #P-1003 | FitAmp血漿/血清DNA分離試劑盒 cat#p-1004 |
FitAmp尿液DNA分離試劑盒
cat#p-1017 |
FitAmp血液和培養細胞DNA提取試劑盒 cat#p-1018 |
FitAmp凝膠DNA分離試劑盒
cat#p-1007 |
FitAmp石蠟組織切片DNA分離試劑盒 cat#p-1009 |
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形式 | spin column | spin column | spin column | spin column | spin column | spin column |
結合能力 | 5 μg | 5 μg | 5 μg | 5 μg | 5 μg | 5 μg |
回收率 | >70% | >70% | >70% | >70% | >70% | >70% |
起始材料 | 組織切片 | 血漿,血清或體液 | 尿液 | 血液白細胞或培養的哺乳動物細胞 | 低熔點瓊脂糖凝膠 | 福爾馬林固定,石蠟包埋的組織 |
輸入量 | 低至1 ng | 低至1 ng | 1 ng to 2 μg | 1 ng to 4 μg | 1 ng to 1 μg | 1 ng to 2 μg |
時間 | 2h | 12min | 20min | 20min | <15min | 2h |
此外還有DNA定量、濃縮、純化和水解試劑盒,有需要可咨詢小艾喲。
【2】DNA甲基化定量檢測試劑
MethylFlash甲基化DNA定量試劑盒(比色) Cat #P-1034 |
MethylFlash Global DNA甲基化(5-mC)ELISA簡易試劑盒(比色) Cat #P-1030 |
MethylFlash Global DNA羥甲基化(5-hmC)ELISA簡易試劑盒(比色) Cat #P-1032 |
MethylFlash 5-甲酰基胞嘧啶(5-fC)DNA定量試劑盒(比色) Cat #P-1041 |
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目的 | 比色法檢測DNA中的5mC | 比色法檢測DNA中的5mC | 比色法檢測DNA中的5hmC | 比色法檢測DNA中的5fC |
關鍵點 | 在主要期刊中被高度引用的方法 與HPLC-MS可比的結果 |
減少交叉變化并提高準確性 快速便捷的“一步式”測定反應 |
強大的第四代MethylFlash技術應用于5hmC研究 | 強大的MethylFlash技術應用于5fC研究 |
起始材料 | DNA | DNA | DNA | DNA |
輸入范圍 | 50-200 ng | 20-200 ng | 50-200 ng | 100-300 ng |
最佳輸入量 | 100 ng | 100 ng | 100 ng | 300 ng |
總時長 | 4 hours | 2 hours | 2 hours | 4 hours |
檢測閾值 | 200 pg of meDNA | 50 pg of meDNA | 10 pg of hMeDNA | 1 pg of fC DNA |
檢測到的甲基化類型 | 5-甲基胞嘧啶 | 5-甲基胞嘧啶 | 5-羥甲基胞嘧啶 | 5-甲酰基胞嘧啶 |
特異性 | >1000:1 meDNA:unMeDNA | >1000:1 meDNA:unMeDNA | >1000:1 hMeDNA:unMeDNA | >1000:1 fC DNA:unMeDNA |
形式 | ELISA-like Microplate-based | ELISA-like Microplate-based | ELISA-like Microplate-based | ELISA-like Microplate-based |
咱們再來看看一兩個產品的檢測結果圖吧:
p-1034
p-1030
上述介紹的都是比色法,此外,還有熒光法試劑盒供大家選擇喲,感興趣的可以聯系小艾~~
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