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  • 發布時間:2021-03-01 15:54 原文鏈接: MemGlow?質膜染色熒光探針在膜標記領域的應用(二)

           MemGlow?應用程序很簡單,當將MemGlow?探針引入水性介質中時,兩親性探針會形成自發淬滅性的聚集體,直到與質膜的接觸引發其解離并分散到脂質雙層中。整合后,熒光探針即可進行生物成像。從MemGlow?488到MemGlow?700,MemGlow?探針產生的信噪比分別為20和3.4,分別之間的背景和顯示出的信號與背景的比值(S / B)強烈的熒光大許多倍。MemGlow?探針是一項技術突破,優于許多現代染色劑,MemGlow?標記非常高效,甚至納摩爾濃度也可以顯示細胞間絲狀偽足和納米管(圖3A和3B)。

     

     

           圖3A. 用MemGlow 488?染色并通過激光掃描共聚焦顯微鏡成像的細胞的3D重建. 用50 nM MemGlow?488染色的KB活細胞5分鐘,無需清洗即可成像. 細胞間絲狀偽足和納米管在細胞之間可見(白色箭頭).   圖像偽彩色為橙色. 圖片由Mayeul Collot等提供. 2019.

     

     

           圖3B. 用20 nM MemGlow?488標記并通過激光掃描共聚焦顯微鏡成像的活KB細胞的質膜. 整個細胞之間可見細胞間絲狀偽足和納米管(白色箭頭). 圖片由Mayeul Collot等提供. 2019.

     

           是什么使MemGlow?成為膜標記領域的領導者?

     

    探針類型 供應商 MemGlow?的優勢
    MemGlow? Cytoskeleton 1. 兩性離子錨定的花青素的探針顯示出出色的熒光量子產率和光穩定性。
    2. 較低的工作濃度(nM)可對小型生物結構進行高分辨率成像,具有低毒性,適合長期成像。
    3. 5種熒光染料,其中2種屬于遠紅外光譜,非常適合多色生物成像。
    4. 與活細胞/固定細胞和組織化學染色兼容。
    5. 親脂性探針對質膜具有特異性,不能通過內吞作用快速內在化。
    DiI,DiO和類似物
    (長鏈花青素)
    Thermo Fisher 1. 與傳統的花青染料相比,MemGlow?需要的工作濃度要低100倍(分別為nM和μM)。
    2. MemGlow?在無毒的低濃度下具有一致的染色效果,而常規的碳菁染料顯示不規則且效率低下的標記。
    WGA Alexa Fluor Thermo Fisher 1. 當細胞匯合時,MemGlow?可以更均勻地標記膜。細胞間接觸會抑制WGA Alexa Fluor接觸多糖,并減少標記。
    2. MemGlow?染色很有效。與WGA Alexa Fluor相比,在相同的相機曝光下,MemGlow?亮度更高,點狀染色更少。
    PKH Millipore Sigma 1. MemGlow?所需的工作濃度比PKH染料低100倍(分別為nM與μM)。
    2. MemGlow?具有簡單的操作流程,與PKH染料不同,不需要探針淬滅。
    3. 尚不清楚MemGlow?會引起生物學變化。
    4. MemGlow?可產生可靠的細胞外囊泡染色,而據報道PKH會改變外泌體大小。
    5. MemGlow?產生一致的染色,而PKH染色產生75%的可行標記細胞。


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