DNA測序儀的試劑器材

　　1．bigdye測序反應試劑盒 主要試劑是bigdye mix，內含peZL四色熒光標記的ddntp和普通dntp，amplitaq dna polymerase fs，反應緩沖液等。

　　2．pgem-3zf (+) 雙鏈dna對照模板 0.2g/l，試劑盒配套試劑。

　　3．m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt，3.2μmol/l，即3.2pmol/μl，試劑盒配套試劑。

　　4．dna測序模板 可以是pcr產物、單鏈dna和質粒dna等。模板濃度應調整在pcr反應時取量1μl為宜。本實驗測定的質粒dna，濃度為0.2g/l，即200ng/μl。

　　5．引物 需根據所要測定的dna片段設計正向或反向引物，配制成3.2μmol/l，即3.2pmol/μl。如重組質粒中含通用引物序列也可用通用引物，如m13(-21)引物，t7引物等。

　　6．滅菌去離子水或三蒸水。

　　7．0.2ml或和0.5ml的pcr管 蓋體分離，pe公司產品。

　　8．3mol/l 醋酸鈉(ph5.2) 稱取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸餾水中，冰醋酸調ph至5.2，定容至100ml，高壓滅菌后分裝。

　　9．70%乙醇和無水乙醇。

　　10．naac/乙醇混合液 取37.5ml無水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混勻，室溫可保存1年。

　　11．pop 6測序膠 abi產品。

　　12．模板抑制試劑(tsr) abi產品。

　　13．10×電泳緩沖液 abi產品。

　　14．abi prism 310型全自動dna測序儀。

　　15．2400型或9600型pcr儀。

　　16．臺式冷凍高速離心機。

　　17．臺式高速離心機或袖珍離心機。