微分干涉相襯法:
為了克服相差法觀察時樣品細節像周圍伴隨有光暈,會掩沒掉本來應該看見的細節,以及樣品或組織切片厚度要求相當薄,原則上下能厚于10?m等局限性,利用雙光束干涉的原理設計子微分干涉相襯法。
調整方法:
a. 必須在庫勒明系統已調好的基礎上才能調好DIC方法
b. 先用10×物鏡,以明視野先確定好能把樣品看清晰的物鏡調焦位置
c. 把起偏器(polarizer)擺入照明光路中,注意其取向應為東—西方向
d. 把聚光鏡轉盤轉到與10×物鏡對應使用的位置上,即DIC 0.3—0.4
e. 在物鏡后方或物鏡轉換器上插入10×物鏡使用的DIC插片(DIC slider)
f. 把檢偏器(analyser)插入成像光路中,注意其取向應為南—北方
g. 換上待觀察的透明樣品,開亮光源把樣品調焦清晰
h. 調節DIC插片,使微分干涉相襯的像達到最佳效果,也就是浮雕效果最為明顯
i. 同時可調節聚光鏡的孔徑光闌,使反差的效果也達到最佳
j. 然后再細微調樣品的細節,可見樣品中不同層面上的結構
k. 如果把補色器(first order red retardation plate)插入,并同時調節DIC插片,可在視野中看到不斷變化的絢麗色彩,紅、橙、黃、綠、藍、紫、粉紅、粉紫及金黃色都具有。適用范圍:透明或不能染色的組織切片,厚度可達100?m左右,培養中的活組織和活細胞、小生生物等。