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  • 發布時間:2021-12-15 13:21 原文鏈接: 發酵培養基的要求

    發酵培養基發酵培養基是供菌種生長、繁殖和合成產物之用。它既要使種子接種后能迅速生長,達到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產物。因此,發酵培養基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外,還要有產物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高,或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時,則可考慮培養基用分批補料來加以滿足。

    操作方法和注意事項如下
    加水
    打開滅菌鍋蓋,向鍋內加水到水位線。立式消毒鍋最好用已煮開過的水,以便減少水垢在鍋內的積存。注意水要加夠,防止滅菌過程中干鍋。
    裝料、加蓋
    滅菌材料放好后,關閉滅菌器蓋,采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣。
    排氣

    打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出,當有大量蒸汽排出時,維持5min,使鍋內冷空氣完全排凈。
    升壓、保壓和降壓
    當鍋內冷空氣排凈時,即可關閉排氣閥,壓力開始上升。當壓力上升至所需壓力時,控制電壓以維持恒溫,并開始計算滅菌時間,待時間達到要求(一般培養基和器皿滅菌控制在121℃,20min)后,停止加熱,待壓力降至接近“0”時,打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣,否則會由于瓶內壓力下降的速度比鍋內慢而造成瓶內液體沖出容器之外。
    滅菌后的培養基空白培養
    滅菌后的培養基放于37℃培養箱中培養,經24h培養無菌生長,可保存備用;斜面培養基取出后,立即擺成斜面后空白培養;半固體的培養基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后,空白培養。

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