HPLC流動相如何選擇

對于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流動相。

甲醇/水作流動相時，如果得到的色譜圖出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質，要選用乙腈/水作流動相。

由于高效液相色譜中流動相是液體，它對組分有親和力，并參與固定相對組分的競爭。因此，正確選擇流動相直接影響組分的分離度。對流動相溶劑的要求是：

（1）溶劑對于待測樣品，必須具有合適的極性和良好的選擇性。

（2）溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器，應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的紫外截止波長指當小于截止波長的輻射通過溶劑時，溶劑對此輻射產生強烈吸收，此時溶劑被看作是光學不透明的，它嚴重干擾組分的吸收測量。

對于折光率檢測器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相，以達最高靈敏度。

（3）高純度。由于高效液相靈敏度高，對流動相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會引起基線不穩，或產生“偽峰”。痕量雜質的存在，將使截止波長值增加50～100nm。