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  • 發布時間:2022-02-17 12:54 原文鏈接: 生化檢測項目βN乙酰氨基葡萄糖苷酶介紹

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶介紹:

             β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷,也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。該酶廣泛存在于各種組織器官、體液、血細胞中,是溶酶體中的一種酸性水解酶。其測定方法有比色法和熒光光度法。

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶正常值:

      (1) 對硝基酚比色法:血清NAG:21.54±6.4U/L,尿液NAG呈正態分布,中位數為9.13U/g肌酐,第95百分位數上限為16.10U/g肌酐。
      (2) 熒光光度法:
      成人血清9.94±2.O7U/L。
      成人尿液6.39±3.19U/L Cre。

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶臨床意義:

      血、尿NAG活性測定對反映腎實質病變,尤其是急性損傷和活動期病變更
      敏感,主要用于早期腎損傷的監測和病情觀察。
      (1) 腎小管疾病:重金屬(汞、鉛、鎘等)及藥物性腎損傷、缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG活性增加。
      (2) 腎病綜合征:尿NAG常明顯增加,緩解期下降,復發時迅速回升,故可作為臨床觀察指征。腎小球腎炎急性期變化較大,但與腎小管損傷相比,變化幅度較小。
      (3) 尿路感染的定位診斷:急、慢性腎盂腎炎尿NAG上升,能與單純性膀胱炎區別。可用于早期上尿路感染的診斷。
      (4) 腎移植排斥反應的監測:腎移植排斥反應早期NAG即可升高,比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。
      (5) 糖尿病腎痛早期診斷:糖尿病腎病尿NAG升高,用于本病的早期診斷優于尿白蛋白及β2-微球蛋白。

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶注意事項:

      (1) 對硝基酚比色法:
      ① 基質對硝基酚應純化,配制前置50℃烘24h。用10mmol/L NaOH配成0.04mmol/L濃度,用窄帶寬分光光度計掃描吸收曲線,λmax=401nm,根據IFCC標準,Aλmax=0.7316-0.7388,Eλmax=18380±90(25℃)。根據對硝基酚的摩爾吸光系數,計算NAG活性單位的公式為:
      

     
      以上公式是根據IFCC的標準E值計算的,各實驗室應根據具體儀器條件測定E值,建立計算式。
      ② 底物溶解度小,配制時應先用適量pH 4.6緩沖液調成糊狀,再逐漸加緩沖液至所需量。
      ③ 測定結果超線性范圍時,應將標本用生理鹽水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。
      ④ 尿酶濃度受尿量影響較大,應留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值計算酶排出率,即不受尿濃縮或稀釋的影響,又不需留24h尿。
      (2) 熒光光度法:
      ① 熒光法測NAG已有國產試劑盒,其敏感度高,不受尿色干擾。
      ② 也可用上海第三分析儀器廠產930熒光光度計,激發濾光片360,發射濾光片用(400+450)復合,效果滿意。
      ③ 本法酶反應液中各成分濃度為:底物1.33mmol/L,枸櫞酸20mmol/L,Na2HPO432mmol/L。
      ④ 配試劑所用溶劑應用重蒸餾水,底物應無游離4-MU,BSA中應無該酶或用50℃加熱2h滅活。
      ⑤ 血清中NAG于4℃穩定數小時至數天,-20℃可穩定數月。尿標本4℃穩定1周,也可用枸櫞酸鹽抗凝血漿。
      ⑥ β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二種酶催化水解,一種是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.30),另一種是β-N-乙酰已糖苷酶(EC 3.2.1.52),只有對提純的酶才能限定EC 3.2.1.30或EC 3.2.1.52。目前國內文獻中常稱的NAG,嚴格地說是按所用底物命名的,而不是指酶對底物的特異性。所以目前國外文獻常泛稱β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶檢查過程:

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