1. 用滅菌吸管吸取 1：10 稀釋的檢液 2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內，每皿 1mL。另 取 1mL 注入到 9mL 滅菌生理鹽水試管中（注意勿使吸管接觸液面），更換一支吸管，并充分混勻，制成 1:100 檢液。吸取 2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內，每皿 1mL。如樣品含菌量高，還可再稀釋成 1:1000，1:10000，……等，每個稀釋度應換 1 支吸管。
2. 將融化并冷至 45℃—50℃的卵磷脂吐溫 80 營養瓊脂培養基傾注到平皿內，每皿約15mL，隨即轉動平皿，使樣品與培養基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置36℃±1℃培養箱內培養 48h±2h。另取一個不加樣品的滅菌空平皿，加入約 15mL 卵磷脂吐溫 80營養瓊脂培養基，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置 36℃±1℃培養箱內培養 48h±2h，為空白對照。
3. 為便于區別化妝品中的顆粒與菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐溫 80 營養瓊脂中加入 1mL 0.5%的 TTC 溶液，如有細菌存在，培養后菌落呈紅色，而化妝品的顆粒顏色無變化。