1.攝入不足 母親在哺乳期少攝入富含葉酸的食物如肝、腎、雞蛋、豆類、綠葉蔬菜等；單純母乳喂養未及時添加輔食；人工喂養不當及嚴重挑食、偏食的小兒易患此癥。葉酸不耐熱，經加熱后約50%～90%被破壞。
2.需要量增加 本病多見于6～18個月的嬰兒，生長發育迅速，對營養物質需要量相對增加，若未及時添加輔食或添加質和量不足均易發生本病。
3.疾病因素 感染時葉酸需要量增加，特別在腹瀉時影響葉酸的吸收，肝臟病影響葉酸的代謝，營養不良者攝取葉酸不足，這些疾病均可致葉酸的缺乏。
4.需要量增加 維生素C缺乏時，不能使葉酸轉化為活性四氫葉酸。葉酸能代替維生素C參與酪氨酸代謝，當維生素C缺乏時，可引起機體對葉酸的需要量增加，造成葉酸不足。
5.結合酶的活性降低 鋅作為葉酸結合酶的輔助因子，對葉酸的吸收亦起重要作用。缺鋅可降低結合酶的活性，并可減少結合酶的量而降低葉酸的吸收。
6.藥物影響 一些抗驚厥藥物可抑制葉酸的吸收，阿司匹林可降低葉酸與血漿蛋白結合能力，從而使儲備型葉酸減少而增加葉酸的排出量。廣譜抗生素抑制了腸道細菌，減少葉酸合成亦可促發本病。