養過皮膚成纖維細胞和THP-1細胞。皮膚成纖維細胞是貼壁生長的。THP-1細胞是懸浮的。由于我們實驗室養細胞的時間也不是很長，所以也只能說說自己平時的操作了。先說皮膚成纖維細胞。當細胞鋪滿瓶底，也就是細胞與細胞之間沒有間隙時，就可以傳代了。一般十天左右傳一代。先吸棄舊培養液，用D-Hanks液洗 兩遍，再加入0.25%的胰酶，加入的量以能覆蓋瓶底為準。加入后輕輕搖晃培養瓶使液體覆蓋瓶底，然后靜置兩分鐘左右，最好是能在顯微鏡下觀察，當細胞之 間出現間隙且有一部分細胞呈現圓形后即可。吸去胰酶，加入含血清培養液，搖晃瓶子使培養液覆蓋瓶底就行了。因為血清可以終止胰酶的消化。然后吹打瓶底各處 使細胞脫落。再分瓶補加培養液。THP-1細胞的傳代就比較簡單了。可以有兩種傳代方法。如果鏡下觀察細胞狀態很好，沒有其它雜質即細胞裂解物之類的，就可以采用直接傳代法。傳代 前將細胞培養瓶直立一個半小時使細胞自然下沉。吸棄上層少量培養液約三分之一，將余下的培養液分成兩瓶，再分別補加培養液即可。如果鏡下觀察覺得培養液中 有雜質即可采用離心傳代法。如果細胞數目較多可以低速離心約600轉離心六分鐘，細胞可以沉淀下來而且可以去除細胞碎片之類的雜質。如果覺得細胞數目不多 比較寶貴，那就提高轉速可以1000轉離心六分鐘，這樣細胞損失很少但可能也有些雜質會一起沉淀下來。離心后去除上清液，加入新的培養液吹打渾勻即可分瓶 傳代了。