照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液精密量取本品適量,用流動相A定量稀釋制成每1ml中含8.3g的溶液。對照品溶液取鮭降鈣素對照品適量,精密稱定,加流動相A溶解并定量稀釋制成每1ml中含8.3μg的溶液。系統適用性溶液取降鈣素C對照品適量,加流動相A溶解并稀釋制成每1ml中含0.01mg的溶液,取100l與對照品溶液900l混勻,即得。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑( Vydac6mm×250mm,5m,孔徑300A或效能相當的色譜柱);以0.02mol/L四甲基氫氧化銨溶液(用磷酸調節pH值至2.5)乙腈(9:1)作為流動相A,以0.02mol/L四甲基氫氧化銨溶液(用磷酸調節pH值至2.5)-乙腈(2:3)作為流動相B,按下表進行梯度洗脫;柱溫為40℃;檢測波長為220nm;進樣體積200l時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)21.01系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,理論板數按鮭降鈣素峰計算不低于5000,降鈣素C峰(與鮭降鈣素主峰的相對保留時間為0.5~0.6)與鮭降鈣素峰間的分離度應大于測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀(進樣前用供試品溶液和對照品溶液1m1分別潤洗進樣瓶1分鐘,重復兩次),記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。