有關物質照高效液相色譜法(通則0512)
測定供試品溶液取本品適量,加流動相溶解并稀釋制成每l中約含0.1mg的溶液。
對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100m量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。系統適用性溶液(1)取阿法骨化醇適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液,在日光或鎢燈光下照射0.5小時系統適用性溶液(2)取系統適用性溶液(1)2ml,在80℃水浴中加熱回流2小時,放冷。色譜條件用硅膠為填充劑;以石油醚(60~90℃)-乙酸酯三氯甲烷(44:42:14)為流動相;檢測波長為265nm;進樣體積20l系統適用性要求系統適用性溶液(1)色譜圖中,反式阿法骨化醇峰相對阿法骨化醇峰的相對保留時間約為0.92,阿法骨化醇峰與反式阿法骨化醇峰之間的分離度應符合要求。
系統適用性溶液(2)色譜圖中,前阿法骨化醇峰相對阿法骨化醇峰的相對保留時間約為1.3,阿法骨化醇峰與前阿法骨化醇峰之間的分離度應符合要求。理論板數按阿法骨化醇峰計算不低于2000。
測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,除前阿法骨化醇峰外,單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%),各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)。