加去離子水約800mL充分攪拌溶解，然后加入濃鹽酸調pH至7.4，最后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 10mmol/L， KH2PO4 2mmol/L
PBS緩沖液一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用，具體試劑一般也有不同的比例配方，在針對性上就有了更好的效果。
1x PBS緩沖液就是0.01M的PBS,可直接使用,2x PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來配置緩沖液,用于其它用處。