唉，這種題就是中國特色，完全理論脫離實際。PCR退火溫度是一個范圍，一般是50度到65度，或者到70度做兩步法PCR。其中，模板的GC含量、模板的組成（單一模板還是cDNA還是全基因組DNA還是別的什么）等等條件都會影響tm值。沒有一個確定的說是多少比較好，都是具體情況具體分析。有的時候引物設計回來，還要做溫度梯度測驗，設計的tm不一定就是最適合的tm。不得不說這題直接問一個數，純屬是閉門造車，一點實驗經歷都沒有只憑空想，答對了也沒有得到任何有用的知識。 好了，如果非要說一個數的話，那么習慣上是55度左右。選項中我更傾向于56度的答案。50度還是偏低，對于稍微復雜的模板來說，非特異性擴增的可能性會增大。我只能說，以我6年分子生物學實驗的經驗和實驗室同行的引物設計習慣來說，一般是55度左右。對于這樣的題，不必過于糾結，沒什么意義。