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  • 發布時間:2020-08-17 17:46 原文鏈接: L乳酸脫氫酶測定

    實驗方法原理


    LDH,S-乳酸:NAD+氧化還原物;L-乳酸脫氫酶。


    L-乳酸 + NAD + ? 丙酮酸 + NADPH + H +


    由于借助 ADH,反應可以從兩個方向檢測,但是對于這個平衡,即使考慮到 NADH 在反應起始時有高吸收值,丙酮酸的還原反應也是首選的。


    實驗材料 LDH 稀釋溶液

    試劑、試劑盒 磷酸鉀NADH丙酮酸

    儀器、耗材 分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.98 ml 實驗混合物



    0.02 ml LDH 稀釋溶液


    25℃ 時,于 340 nm 處吸收值降低。NADPH的吸收系數ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。


    注意事項

    其他

    試劑:


    0.1 mol/l 磷酸鉀 pH 7.0


    0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于10 ml H2O 中)


    0.1mol/l 丙酮酸(丙酮酸鈉,Mr=110;110 mg溶于10 ml H2O 中)。


    LDH 原料溶液(從豬心臟提取,例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸鉀 pH 7.0 稀


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