上海巴斯德所腸道病毒71型基因工程疫苗研發取得新進展

　　手足口病是五歲以下兒童中常見的病毒性傳染病，腸道病毒71型（EV71）是引起兒童手足口病的最重要病原體，主要通過糞口途徑傳播，感染的患兒可能表現出嚴重的神經系統損傷和并發癥，如腦干腦炎、脊髓灰質炎樣的癱瘓和肺水腫等癥狀，甚至危及患兒生命。然而，目前仍然沒有商業化的疫苗來預防EV71感染。

　　中國科學院上海巴斯德研究所疫苗學和抗病毒策略研究組致力于基于病毒樣顆粒（VLP）的手足口病基因工程疫苗研發，前期工作已經利用昆蟲細胞表達系統，完成了EV71單價、CA16單價及EV71/CA16雙價VLP疫苗的臨床前有效性驗證（Vaccine 2012；PLoS ONE 2013；Vaccine 2014）。為提高手足口病基因工程疫苗的產業化潛力，該課題組著眼于開發一種更高產廉價的手足口病VLP疫苗。最近，他們驗證了腸道病毒71型病毒樣顆粒疫苗在巴氏畢赤酵母中的高產表達及其抗病毒保護效果，該項成果為進一步開發酵母來源的手足口病雙價或多價基因工程疫苗奠定了基礎。

　　博士研究生張超等在研究員黃忠的指導下，嘗試用畢赤酵母表達EV71-VLP，并在EV71感染小鼠模型上評價其保護效果。研究顯示，在畢赤酵母中共表達P1和3CD蛋白，獲得EV71-VLP的高水平表達和組裝，所產生的VLP能在小鼠中誘導針對EV71的中和性抗體；鑒于糞口途徑感染是EV71自然感染的主要方式，研究人員利用自主構建的EV71口服感染小鼠模型評價疫苗的保護效果，發現用畢赤酵母表達VLP免疫后的小鼠能夠完全抵抗EV71病毒的口服感染。畢赤酵母表達的EV71-VLP具備產量高、成本低和操作簡單等優點，因而產業化前景良好。

　　該項研究成果的研究論文High-yield production of recombinant virus-like particles of enterovirus71 inPichiapastoris and their protective efficacy against oral viral challenge in mice 于4月23日在國際疫苗學期刊Vaccine上在線發表。

　　此項工作得到國家自然科學基金、上海市科學技術委員會和上海巴斯德所基金會等項目的支持。

VLPs的母源免疫能保護新生小鼠抵抗EV71病毒的口服感染。（A）存活率，（B）臨床癥狀。