凝血酶的效價測定

　　纖維蛋白原溶液的制備

　　取纖維蛋白原約30mg，精密稱定，用0.9% 氯化鈉溶液1.5ml溶解，加凝血酶0.1ml(約3單位)，快速搖勻,室溫放置約1小時至完全凝固，取出凝固物，用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產生渾濁，在105℃干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.9%氯化鈉溶液制成含0.2%凝固物的纖維蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節pH值至7.0～7.4，再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液，備用。

　　標準曲線的制備

　　取凝血酶標準品，用0.9%氯化鈉溶液分別制成每1ml中含5.0單位、6.4單位、8.0單位、10.0單位的標準品溶液。另取內徑1cm、長10cm的試管4支,各精密加入纖維蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保溫5分鐘，再分別精密量取上述4種濃度的標準品溶液各0.1ml，迅速加入上述各試管中，立即計時、搖勻，置37℃±0.5℃水浴中，觀察纖維蛋白的初凝時間，每種濃度測5次,求平均值（5次測定之最大值與最小值的差不得超過平均值的10%,否則重測）。標準品溶液的濃度應控制凝結時間在14～60秒為宜。在雙對數坐標紙上，以每管中標準品實際效價（單位）為橫坐標，凝結時間（秒） 為縱坐標，繪制標準曲線。

　　測定法

　　取本品3瓶，分別精密稱定其內容物的重量,每瓶按標示量分別加0.9%氯化鈉溶液制成與標準曲線濃度相當的溶液，精密吸取0.1ml，按標準曲線的制備方法平行測定5次，求出凝結時間的平均值（誤差要求同標準曲線），在標準曲線上或用直線回歸方程求得效價（單位），

　　式中U為0.1ml供試品在標準曲線上讀得的實際效價(單位)；

　　V為每瓶供試品溶解后的體積，

　　10為0.1ml換算成1.0ml的數值；

　　W為每瓶供試品的重量，mg。

　　并計算出每瓶相當于標示量的百分數。

　　每瓶效價均應符合規定，如有一瓶不符合規定，另取3瓶復試，均應符合規定。