一般做包涵體復性,所用的變性劑是8M尿素和6M鹽酸胍,是兩個一起用的。只用一個有時候效果確實不怎么好。而且啊,在變性劑中,也是有部分蛋白不會溶的,所以多少都會有沉淀的。做包涵體復性很麻煩,我建議你試試通過調節誘導條件,增加可溶性表達的比例好些。一般像PET系統降低誘導溫度可以顯著提高可溶性表達的比例。
7月5日,國際學術期刊TheJournalofBiologicalChemistry發表了中科院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所胡紅雨課題組的研究論文——StructuralTransfo......
摘要外源基因在大腸桿菌中高效表達時,通常會形成不溶性、無活性的蛋白聚體——包涵體。包涵體中富含表達的重組蛋白質,它們經分離、洗滌、變性溶解以及復性等過程才能得到具有生物活性的蛋白質。近年來,隨著對包涵......