獲得性免疫缺乏綜合征簡稱艾滋病（AIDS），是由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus， HIV）引起的一種嚴重傳染性疾病。酶聯免疫吸附法（Elisa）最早應用于艾滋病毒的篩查，1985年研制成功的第一代HIV Elisa試劑[2]敏感性和特異性欠佳，至今已發展至第四代。Gag基因編碼HIV病毒核心蛋白包括p17、p24、p15[3-7]，P24在血清轉換的很短時期內就可以被第四代試劑檢測出來，因此第四代HIV Elisa試劑將檢測的“窗口期”從三代的22天左右減少到16天左右[8]。
化學發光法（CLIA）的主要原理[9]是將酶免疫發光物質標記在抗原或抗體上，加入氧化劑或酶底物而發光，通過標準曲線測定發光強度來確定待測物的含量。本實驗將化學發光法和酶聯免疫吸附法兩種檢測方法進行對比評價。
1 材料與方法
1.1 標本來源收集
本院2014年 3月至 2015年 9月期間所有術前檢查病人共計35420例，年齡10～89歲，其中男性24003例，女性11417例。
1.2 試劑
HIV抗原抗體聯合檢測試劑盒，化學發光酶免試劑，人類免疫缺陷病毒（HIV1+2型+p24）抗體免疫印跡試劑盒（簡稱WB，新加坡 Genelabs）。 1.3 方法
1.3.1 Elisa法檢測HIV病毒 Elisa檢驗血清HIV抗體采用雙抗原夾心法。包被：將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/mL，在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1mL，4℃ 過夜。第二天，棄孔內溶液，緩沖液洗滌；加樣：加待檢樣品于上述反應孔中，置37℃孵育1h（同時做空白孔、陰性對照孔及陽性對照孔）；加酶標抗體：在各反應孔酶標抗體37℃孵育1h，緩沖液洗滌；加底物液顯色：向各反應孔中加TMB底物溶液，37℃ 10min；終止反應：于各反應孔中加入硫酸。
1.3.2 CLIA法檢測HIV病毒 CLIA法檢驗模式為雙抗原夾心一步法免疫分析，借助于HIV（1+2）抗原制作出固相抗原，并將HIV（1+2）抗原采用辣根過氧化物酶進行標記，由此和待測樣品中的HIV抗體兩者就可以形成雙抗原夾心，洗滌之后，將化學發光底物液加入其中 ，測定其發光值。
1.3.3 免疫印跡檢測法（WB）檢測HIV病毒 HIV進行培養、濃縮、純化；HIV抗原在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳按照分子量大小而分離；將分離的抗原轉移到硝酸纖維素膜上，將其切割成包含全部病毒蛋白的按照分子量大小排列的條膜；在反應槽中加待測樣品與條膜孵育，洗滌；加辣根酶標記的二抗；加顯色試劑。
1.4 判斷標準
化學發光法：S/CO≥1.00 為陽性，500 時，WB確認實驗 均為HIV陽性；CLIA 檢測結果S/CO值≤500時，WB確認實驗有可能為陰性；S/CO值越低，W B檢測結果為陰性的可能性越大。
3 討論
據報道[10]全球約有3億多人攜帶艾滋病毒，而我國在1985年發現首例艾滋病患者，到2014年二十年時間，患病人數已經達到10.4萬例，患者分布也從單一省份擴增到全國20多個省。性傳播、 經血傳播和母嬰垂直傳播[11-13]是人類感染HIV病毒的三條途徑，而血液傳播是主要途徑。因此早期篩查血液HIV病毒，對HIV患者的早診斷具有重要價值。
1998年Elisa第四代試劑問世，第四代Elisa試劑可以同時檢測p24抗原和HIV 1+2抗體，有效縮短了“窗口期”，因此得到廣泛應用。但是由于一項檢測同時與病毒、抗體結合，增加了相互干擾的機會，從而降低了第四代Elisa試劑的靈敏度和特異性[14-15]。而化學發光法[16-17]作為新型的免疫學檢測技術，因其靈敏度高較高。
從本實驗結果來看，化學發光法的真陽性率高于Elisa法，說明化學法試劑能在HIV病毒抗體效價較低時發揮作用，檢測患者HIV陽性，因此更有效避免臨床漏診現象。但是我們發現化學發光法的假陽性率也有所增加。通過對比S/CO不同區間，化學發光法的假陽性率發生在S/CO≤500并且隨著S/CO值降低，假陽性率升高明顯。因此在用化學發光法篩查血液HIV病毒，在S/CO值比較低時，應注意對此病例的復檢，同時加做WB，避免假陽性的情況出現。
綜上所述，化學發光試劑靈敏度高，操作簡單，非常適合血液HIV病毒的早期篩查。但是應注意假陽性率高的問題，通過進一步實驗進行確認，提高HIV篩查質量。