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  • 發布時間:2021-05-15 17:16 原文鏈接: 原代細胞凍存技術

    1、選用生長情況好,數量較多的原代細胞,凍存前一天換液一次。

    2、貼壁細胞需用0.25%胰酶常規消化將細胞消化下來,將細胞懸液收集至離心管中。

    3、1000rpm離心5分鐘,棄上清液。

    4、沉淀加含DMSO的培養液,計數,調整至(1-10)×106 /ml。

    5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。

    6、密封凍存管,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。

    7、用記號筆標明細胞種類,凍存日期。

    8、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃過夜)→液氮。


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