原料乳中三聚氰胺快速檢測液相色譜法

1 范圍

本標準規定了液相色譜法快速檢測原料乳中三聚氰胺的方法。

本標準適用于原料乳，也適用于不含添加物的液態乳制品。

本標準定量檢測范圍為0.30mg/kg～100.0mg/kg，方法檢測限為0.05mg/kg。

注：當原料乳中三聚氰胺的含量大于100.0mg/kg時，具體操作方法見6.2.2.3.2。

2 規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的

修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究

是否可使用這些文件的zui新版本。凡是不注日期的引用文件，其zui新版本適用于本標準

GB/T6379.1 測量方法與結果的準確度（正確度與精密度） 第1部分：總則與定義

GB/T6379.2 測量方法與結果的準確度（正確度與精密度） 第2部分：確定標準測量方法重復性與

再現性的基本方法

GB/T6682 分析實驗室用水規格和實驗方法

3 原理

用乙腈作為原料乳中的蛋白質沉淀劑和三聚氰胺提取劑，強陽離子交換色譜柱分離，高效液相色譜

-紫外檢測器/二極管陣列檢測器檢測，外標法定量。

4 試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純或以上規格，水為GB/T6682規定的一級水。

4.1 乙腈（CH3CN）：色譜純。

4.2 磷酸（H3PO4）。

4.3 磷酸二氫鉀（KH2PO4）。

4.4 三聚氰胺標準物質（C3H6N6）：純度大于或等于99%。

3

4.5 三聚氰胺標準貯備溶液：1.00×10 mg/L。

稱取100mg 三聚氰胺標準物質（準確至0.1mg），用水完全溶解后，100 mL 容量瓶中定容至刻度 ，

混勻，4℃條件下避光保存，有效期為1個月。

4.6 標準工作溶液：使用時配制。

2

4.6.1 標準溶液A：2.00×10 mg/L。

準確移取20.0 mL 三聚氰胺標準貯備溶液（4.5），置于100mL 容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻 。

4.6.2 標準溶液B：0.50mg/L。

準確移取0.25mL 標準溶液A（4.6.1），置于100mL 容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

4.6.3 按表1 分別移取不同體積的標準溶液A（4.6.1）于容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。按表2

分別移取不同體積的標準溶液B（4.6.2）于容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

4.7 磷酸鹽緩沖液：0.05 mol/L。

稱取6.8g磷酸二氫鉀（4.3）（準確至0.01g），加水800mL完全溶解后，用磷酸（4.2）調節pH至3.0，

用水稀釋至1L，用濾膜（4.9）過濾后備用。

4.8 一次性注射器：2 mL。

4.9 濾膜：水相，0.45μm。

4.10 針式過濾器：有機相，0.45μm。

4.11 具塞刻度試管：50mL。

5 儀器

5.1 液相色譜儀：配有紫外檢測器/二極管陣列檢測器。

5.2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。

5.3 pH計：測量精度±0.02。

5.4 溶劑過濾器。

6 測定步驟

6.1 試樣的制備

稱取混合均勻的15 g原料乳樣品（準確至0.01g），置于50mL具塞刻度試管（4.11）中，加入30mL

乙腈（4.1），劇烈振蕩6 min，加水定容至滿刻度，充分混勻后靜置3 min，用一次性注射器（4.8）吸

取上清液用針式過濾器（4.10）過濾后，作為高效液相色譜分析用試樣。

6.2 高效液相色譜測定

6.2.1 色譜條件

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