填充色譜柱的制作

填充色譜柱的制作

• 管材: 玻璃管, 金屬管和塑料管.

• 尺寸: 分析用的填充色譜柱管外徑有3.18, 4.76和6.35mm三種; 供制備用的填充色譜柱管外徑1-10cm; 色譜柱的長度都很少超過10m; 分析用填充色譜柱的長度大多在3m以內.

1.不同填充色譜柱尺寸條件下載體粒徑和載氣流量的選擇

注: 短柱長度大于3米, 長柱長度小于3米

2.色譜柱的試漏

將色譜柱浸在水中, 出口堵死通氣, 在高于使用壓力條件下不應有氣泡冒出. 注意在清洗后還應試漏一次, 以防止因堵在漏洞處的污物被清洗后造成的泄漏.

3.色譜柱的清洗

• 玻璃柱: 可用洗耳球將K2CrO4.H2SO4洗液吸入, 浸泡一段時間后用自來水沖洗至中性后烘干備用.

• 銅柱: 用10%的鹽酸溶液浸泡. 為了增加去污效果應用水泵抽洗, 直至抽洗液中沒有金屬, 銅銹或其他懸浮雜質為止, 然后用自來水沖洗至中性后烘干備用.

• 不繡鋼柱: 用5%-10%的熱NaOH的水溶液抽洗4-5 次, 以除去管內壁的油膩和污物, 然后用自來水沖洗至中性后烘干備用.

4.載體的選擇

常用的載體有紅色硅藻土載體, 主要用于分析非極性和弱極性化合物, 白色硅藻土載體, 主要應用于極性和堿性物質的分析, 非硅藻土載體如玻璃微球可分析甾族化合物, 氟載體耐腐蝕用于分析強極性化合物.

5.載體和固定液的用量

先依據柱長和柱內徑計算所需載體的體積（V）, V=πr2L （r, L均以cm為單位）. 然后用量杯量取計算值V的1.2倍的載體在天平上稱量質量（m=V/ρ）, 再按配比稱取固定液的質量, 常用固定液的質量百分含量為5-30%.

6.溶劑的選擇

所選溶劑應不和固定液發生化學反應, 但能和固定液形成無限互溶體系, 且容易揮發, 選擇的依據是溶劑和固定液之間的相似相溶原理, 溶劑的用量為載體體積的0.8-1.0倍.

7.固定液的涂漬

• 浸漬法: 將固定液溶于適量溶劑中, 待完全溶解后, 迅速傾入載體, 輕輕攪拌均勻, 用紅外燈加熱使溶劑緩慢揮發. 使用低溫固定液時, 盡量使溶劑緩慢自然蒸發.

• 回流法: 難溶解的固定液可與溶劑回流加熱至溶解, 然后倒入載體加熱回流1.5-2 h, 倒出使溶劑揮發掉, 其中的載體在配置前應先烘干.

• 減壓抽濾涂漬: 在吸濾瓶中放入10ml液相溶液, 加20 g載體. 用水泵抽吸濾瓶幾分中, 然后停止抽吸, 放置15分鐘. 將吸濾瓶中的物質倒入燒結玻璃漏斗中, 抽真空15分鐘后將載體分散在濾紙上干燥, zui后在80-l00℃的烘箱中干燥, 熔點低的溶液應在室溫下干燥.

8.固定相的裝填與成型

固定相的裝填應緊密, 均勻, 不能存在溝槽和斷裂, 同時柱端的死體積要小, 裝填過程中還應防止載體破碎. 在鏈接色譜柱時, 一定要注意方向！把原來接真空泵的, 裝填比較緊密的一端接檢測器, 另一端接汽化室. 這樣可以提高柱出口壓力, 使載氣的線速均勻, 柱效高, 若方向接反, 柱效將下降約10-20%. 常用的固定相的裝填方法有

• 振動法: 將柱管直立, 一端塞上玻璃棉, 由上端漏斗加入固定相, 邊裝邊敲, 裝滿后用玻璃棉（zui好經過硅烷化）堵死, 再加工成所需形狀.

• 抽空法: 裝填螺旋柱時可用有干燥裝置的真空泵抽, 抽空時稍加振動, 柱一端堵好玻璃棉防止載體進入泵內.

9.色譜柱的老化

涂漬好的柱子, 使用前都需經過老化處理, 以除去制備柱子時可能產生的揮發性成分和不穩定物質. 老化溫度一般應選在固定相最高使用溫度之下, 實際操作使用溫度之上, 老化時將制得的柱裝在色譜儀上, 并將柱末端和檢測器斷開, 緩慢升溫. 或者可選擇在高于使用溫度20-50℃的條件下通氮氣老化至少6-8 h. 注意老化過程色譜柱出口不能接監測器以防污染.