小麥花粉萌發與雙受精過程

本實驗以小麥為材料，觀察小麥花粉在柱頭上萌發和花粉管生長情況。在示范鏡下觀察小麥雙受精過程中雌、雄性核的融合情況。并進行花粉人工誘導萌發試驗，測定花粉生活力。

（一）小麥花粉在柱頭上的萌發

取揚花時小麥柱頭的整體封片進行觀察。在制片中可看到小麥柱頭二裂，羽毛狀，具多分枝。大量花粉落在柱頭上，不少花粉正在萌發，或花粉管已伸入柱頭組織。轉換到高倍物鏡下，旋轉細聚焦器，可看到花粉管在柱頭分枝中的生長情況，有時能觀察到花粉管中的精子。

（二）花粉的人工誘導萌發試驗

利用簡易馬鈴薯培養基① 進行花粉人工培養誘導萌發試驗。

取即將散粉的玉米雄穗或小麥穗等適宜材料。將花粉灑在事先準備好的涂抹有一薄層馬鈴薯培養基的載玻片上。將載玻片放進鋪有粗濾紙的培養皿中，加適量水，以保持濕度。然后將培養皿置25℃左右的恒溫培養箱中進行人工培養，以誘導花粉萌發。

在開始培養后間隔一定時間（半小時、1小時、2小時、3小時……），取出載玻片在實體解剖鏡下觀察花粉的萌發情況，可粗略計算其萌發率。也可用醋酸洋紅或棉藍染色后觀察，可看到花粉長出萌發管，以及有1—2枚精子進入花粉管等情況。

（三）小麥的雙受精過程

當花粉管穿過珠孔將其內含物釋放入胚囊的助細胞中后，一枚精子趨向極核方向；另一枚精子進入卵細胞。進入卵細胞的精子向卵核靠攏，開始了配子融合。雌、雄配子核的融合過程大致如下：首先雌、雄性核的核膜在相互接觸處融合；然后精核中的染色質紐松解，并出現雄性小核仁；進一步，精核染色質和卵核染色質融合，同時雌、雄性核仁也相互融合成為一個較大的核仁。至此，精卵結合過程完成，形成合子（圖46-1）。合子經過一定時間的休眠后，開始細胞分裂，發育成為胚。精子與極核的融合比精子與卵細胞的融合開始稍早或同時開始。小麥的兩個極核在受精前只是相互靠攏而不融合。待精子與其中一極核靠攏后，三核同時開始融合。其融合的具體步驟與上述精卵融合過程相似，只是三核合并的速度要快得多。另外，精子與極核融合后形成的初生胚乳核的休眠期比合子的休眠期短，較快進入初生胚乳核的分裂。所以，常在制片中看到精卵結合尚在進行中，而初生胚乳核已開始分裂，形成若干胚乳游離核。　　在示范鏡下觀察小麥受精過程中不同時期的永久制片。制片為小麥子房縱切面的連續切片。每觀察一張制片時都應先在低倍物鏡下按順序移動切面，找到所需要的切面，然后轉到高倍物鏡下，作仔細觀察。在示范鏡下，也可左右移動幾個連續切面，作一些補充觀察。

1．花粉管進入胚囊，并向助細胞中傾入精子觀察小麥胚珠珠孔端的卵器，其卵細胞較大，鴨梨形，一側緊貼有助細胞。轉動細聚焦器可看到助細胞中有染色較深的一枚或二枚精子（圖46-2，A）。

2．精卵的結合 制片中可觀察到有一枚精子進入卵細胞，并與卵核靠攏，開始了雌、雄性核融合過程；有些制片在卵核中可見到兩個大小不同的雌、雄性核仁，說明精卵結合正在進行中（圖46－ 2，C）。

3．精子與極核融合 精子與極核融合過程進行很快，往往難以獲得制片。一般制片為初生胚乳核已形成，并開始核分裂；或者精子與極核即將完成融合，在合并的極核中可看到兩個大的雌性核仁和一個小的雄性核仁（圖46-2，B）；另一些制片中則已有二個胚乳游離核形成，游離核一般較大，其中常有2—3個核仁，較易辨認。