巨噬細胞體外培養后功能檢測的方法

巨噬細胞體外培養后功能檢測的方法
1.吞噬中性紅的方法：
取制備的24孔或96孔板Mφ單層，然后向每孔加入0.1%的中性紅生理鹽水液，繼續
培養20
min，傾去上清液，用溫PBS洗3遍，去除未被吞噬的中性紅顆粒，每孔加入細胞溶解液(乙酸∶無水乙醇=50∶50)
0.2
ml，室溫下放置2～3
h，待細胞溶解后，即在酶標儀上測波長540
nm處的吸收度A
，加培養基作為對照組。
2.
墨汁吞噬試驗的方法：
將巨噬細胞用PBS洗2次后，調細胞密度為5×105
ml-1，每0.1
ml加入濾紙濾過的優質墨汁10
μl。37℃溫育30
min或4
h，洗去游離墨粒，甩片，Wright’s染色，油鏡下計數胞漿中吞
有大小墨粒5個以上的陽性細胞。