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  • 發布時間:2018-08-06 17:42 原文鏈接: 干化學尿液分析儀的原理和使用

      尿液分析儀是測定尿中某些化學成分的自動化儀器,它是醫學實驗室尿液自動化檢查的重要工具,此種儀器具有操作簡單、快速等優點。但是尿液分析儀人使用不當和許多中間環節及影響因素都直接影響自動化分析結果的準確性,不僅會引起實驗結果的誤差,甚至延誤診斷因此要求操作者對自動化儀器的原理、性能、注意事項及影響因素等方面的知識在有充分的了解,正確地使用自動化儀器,這樣才能使尿液分析儀得出的結果更可靠、準確。 
      一、尿液分析儀原理 
      此類儀器一般用微電腦了控制,采用球面積分儀接受雙波長反射光的方式測定試帶上的顏色變化進行半定量測定。試劑帶上有數個含各種試劑的試劑墊,各自與尿中相應成分進行獨立反應,而顯示不同顏色,顏色的深淺與尿液中某種成分政權比例關系,試劑帶中還有另一個“補償墊”,作為尿液本底顏色,了對有色尿及儀器變化待所主生的誤差進行補償。 
      將吸附有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內,試劑帶上已產生化學反應的各種試劑墊被光源照射,其反射光被球面積分儀接收,球面積分儀的光電管被反射的雙波長光(通過濾片的測定光和一束參考光)照射,各波長的選擇由檢測項目決定。 
      二、尿試帶試驗方法 
      1.尿PH檢查:結果有二重含義:①反映體內酸堿代謝狀態;②由于尿蛋白、尿比密的測定原理是基于膜尬上最后PH試劑的顏色變化,因此分析PH變化還有監控尿PH變化對其它膜尬區反應的干擾作用。 
      2.尿比密檢查:尿比密測定曾采用懸浮法和折射儀法,主要測定尿內固體物濃度隨著10項尿液分析儀的問世,試帶法測定尿比密得到廣泛使用,其膜塊中主要含有多聚電解質(甲乙烯酸酰馬不酐)、酸堿指示劑及緩沖物,這是采用酸磚瓦指示劑法,其原時是根據經過多聚電解質的Pka改變與尿液離子濃度相關原理。麻劑條中的多聚電解質含有隨尿標本中離大濃度則解離的酸性基團,離子越多,酸性基團解離子越多,而使膜尬中的PH改變,這種改變可由膜塊中的酸堿性指示劑的顏色變化顯示出來,進而換算成尿液的比密值。 
      3.尿蛋白檢查尿液分析儀尿蛋白測定是根據指示劑蛋白誤差原理,膜塊中主要含有酸堿性指示劑溴酚蘭、枸櫞酸緩沖系統和表南的活性劑。在PH3.2時,溴酚產生的陰離子,與帶陽離子的蛋白質(白蛋白)結合后發生顏色變化。 
      4.尿葡萄糖測定:尿試帶法測定尿葡萄糖是采用酶法。其膜塊中含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶和色原。不同廠家采用的色源有異主要有二類:①采用碘化鉀做色原,陽性反應呈紅色;②采用鄰甲聯苯胺作色原,陽性反應呈藍色。其測定原量是葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和過氧化氫,后者再由過氧化物酶催化釋放出[0],而使色原呈顏色,以此類方法最常用。 
      5.尿酮體檢查:檢測尿酮體的膜塊中主要含有亞硝基鐵氰化鈉,或與尿液中的乙酰乙酸、丙酮主生紫色反應。其對乙酰乙酸的敏感性為50-100mg/L對丙酮則為400-700mg/L,不與β-羥丁酸起反應。 
      6.尿膽紅素、尿膽原檢查:尿膽紅素測定原理是結合膽紅質在強酸性介質中,與2,4-二氯苯胺重氮鹽起偶聯反應呈紫紅色;測定尿膽原的原理與改良Ehrlich法相同。 
      7.尿亞硝酸鹽檢查:膜塊中主要含有對氨基苯砷酸和1,2,3,4-四羥基對苯喹啉-3酚。大多當數尿路感染由大腸埃希菌引起的,正常人尿液中含有來自食物或蛋白質代謝產生的硝酸鹽,池尿液中有大腸埃希菌感染增殖時,將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,可將膜塊中對氨基礎苯砷酸重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4-四羥基對苯喹啉-3鞭偶聯使膜塊產生紅色,借以診斷患者是否被大腸埃希菌感染,其檢出敏感度為0.03-0.06g/l。尿液中亞硝酸鹽檢出率受感染細菌是否含有硝酸鹽還原酶,食物中是否含有選題的硝酸鹽、尿液標本是否在膀胱停留4小時以上三者影響,符合上述三個條件,此試驗的檢出率為80%,反之可呈現陰性結果。因此本試驗陰性關不能排除細菌尿的可能,以樣亞硝酸鹽試驗陽性也不能完全肯定泌尿系統感染,標本放置過久或污染可呈假陽性,應結合其它尿液分析結果,綜合分析得出正確的判斷。 
      8.尿白細胞檢查:尿試帶法檢查尿內白細胞的原理基于中性粒細胞胞質內含有特異性酯酶,可或作用于膜塊中的吲哚酚酯,關與重氮鹽反應形成紫色縮合物,其顏色深淺與中性粒細胞的多少呈正比例關系。操作時應注意:①尿液標本必須新鮮,留尿后應立即測定,以免白細胞契壞,導致干化學法與鏡檢法人為的實驗誤差;②此法只能測中性粒細胞,不與單核細胞、淋巴細胞反應,在腎移植病人發生排異反應時,尿中的以滿面春風巴細胞為主的或其它病因引起的單核細胞尿時會產生陰性結果;③尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時,吉產生假陽性;尿蛋白>5g/L或尿液中含有大劑量先鋒霉素等紅物時,可便結果偏低或出現假性結果。 
      9.尿血紅蛋白、尿紅細胞檢查:膜塊中主要含有過氧化氫茄香素或過氧化氫烯鈷和色原(如鄰甲聯苯胺)兩種物質。其原理為尿液中紅細胞內的血紅蛋白或其破壞釋放出的血紅蛋白均具有過氧化氫酶樣活性,可使過氧化氫茄香素或過氧化氫烯鈷分解出[0],后者能氧化有關色原(如鄰甲聯苯胺)使之呈色。 

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